免疫乳及其抗炎子研究.pdfVIP

堡圭耋堡兰耋 墨堡垒垒苎苎丝里主至耋 耋!!堡兰查茎 摘要 含有特异性乳抗体(miIk milk)，免疫乳中除含有 a11tibody)的乳称为免疫乳(immune 乳抗体外．还含有机体免疫应答过程中产生的一些淋巴因子，免疫乳中的抗炎因子就是 其中的一种。本研究对免疫乳及免疫乳中抗炎因子进行了系统的研究。：主要研究结果如 下： 以24株人肠道病原菌(包括病原性大肠杆菌12株、沙门氏菌8株、志贺氏菌3株、 小肠结肠炎耶尔森氏菌1株)作为抗原，对乳牛进行系统免疫，免疫乳与非免疫乳乳中 IgG含量无显著差异。系统免疫并不增加乳中IgG的含量，但IgG的抗体特异性大大增 强，所得的免疫初乳(immulle 凝集价为2“2”，为普通初乳(regIllar 倍；免疫常乳(immIlIlemiIk)中乳抗体对24种不同病原菌的凝集价为25．28，为普通乳 (regulⅡmiu()中乳抗体凝集价的8．128倍。 免疫乳中的IgG较普通乳中的IgG可显著抑制大肠杆菌和沙门氏茵的生长。免疫乳 中特异性的IgG对大肠杆菌和沙门氏菌所致小鼠腹泻具有很好的保护作用，而普通乳中 非特异性的IgG则无此作用，这是由于IgG的特异性所决定。j 用。免疫乳粉较普通乳粉可显著增加小鼠肠道中双歧杆菌和乳杆菌的数量以及肠道中乳 酸和已酸的含量，同时可显著降低小鼠肠道中肠球菌、大肠杆菌及产气荚膜梭菌的数量。 免疫乳粉可显著增强小鼠的体液免疫功能和细胞免疫功能，提高巨噬细胞的吞噬能 力和NK细胞的活性。 免疫乳粉对角又菜胶和甲醛致炎引起的大鼠足趾肿胀具有显著的抑制作用，同时可 显著降低炎性组织中PGE2的含量．免疫乳粉对小鼠肉芽肿也具有显著的抑制作用。 f以免疫乳粉作为添加剂制备的婴儿免疫乳粉LDs010眺g：Ames试验及小鼠骨髓微 核试验和小鼠精予畸变试验表明婴儿免疫乳粉无致畸变作用．大鼠30天喂养试验表明， 婴儿免疫乳粉对大鼠生长无不良影响，大鼠血液指标正常，病理学检查未见任何病变。 IgG的稳定性下降：IgG可耐受1．0M以下的盐酸胍。当盐酸胍浓度大于1．0M时，IgG 的分子稳定性下降。一定浓度的蔗糖对IgG的酸碱稳定性、热稳定性及分子稳定性具有 很好的保护作用．免疫乳中IgG的热变性属于1．2级反应．在65℃、70℃、75℃、及80 和HTST巴氏杀菌对免疫乳中IgG活性影响较小；若采用UHT工艺，IgG全部失去活性。 采用中空纤维超滤器(分子截量为100kd)从免疫初乳乳清中分离IgG，IgG的收率 为94．15％；采用盐析一超滤联合法进行分离，可进一步提高IgG的纯度，可达80．90％， 但IgG收率下降，为80．7l％。 以免疫乳作为原料制备千酪，采用超滤法从干酪生产的副产物一免疫乳清(immune milk 鲞墼耋 翌薹 !!!!兰i星 95％，lgG占 上，1wPc得率为1．2％(W，v)，其中蛋白质含量为40．44％，IgG含量为3 总蛋白的9．76％。制得的1wPC中乳抗体对24种不同病原菌的凝集价为640—10240，为 非免疫WPc的16．512倍。 milk 以免疫乳作原料制各免疫酸乳(immlIlleyoghun)，免疫乳中特异性的IgG对乳酸 菌生长没有影响，同时乳酸菌的发酵不影响IgG的活性。制各的免疫酸乳中乳抗体凝集 价为128，普通酸乳中乳抗体活性几乎测不到。 采用超滤、离子交换色谱及凝胶过滤色谱从免疫初乳中分离缠化出了抗炎因子 AIF对角叉菜胶和甲醛所致的大鼠足趾炎症具有十分显著的抗炎效果，同时可显著降低 大鼠足趾炎性组织中PGE2的含量。(2)小鼠耳壳肿胀模型试验结果表明，AⅡ的最佳 作用时间为致炎前0．5小时，之后随时间延长，AIF的抗炎效果逐渐减弱。(3)AIF抗炎 效果的最佳给药途径为静脉注射(i．v)，依次分别为皮下注射(i．s)腹腔注射(i．p)口服 (o．p)，i．s、i．p、o．p途径的抗炎效果分别为i．v途径的67．95％