细菌诊断学创新.ppt

细菌学诊断基础 韩惠瑛 第一部分 绪论 微生物包括 非结构型：体积小，不具备细胞结构，必须在活细胞内才能增殖，如病毒。 原核细胞型：仅有核质，无核膜和核仁，缺乏完整细胞器，如细菌、螺旋体、支原体 真核细胞型：细胞核的分化程度高，有核膜、核仁和染色体，完整的细胞器，如真菌 微生物的分布广 利与弊-----能引起人和动物发病的细菌称为病原菌 微生物的发展史——19世纪中叶发展为一门科学，实际是从发明显微镜之后发现了微生物世界 1、形态学时期，17世纪末至19世纪中叶近200年 2、生理学及免疫学时期 3、近代微生物时期 一、细菌基本形态 1、球菌 双球菌（diplococcus） 葡萄球菌 Staphylococcus 链球菌Streptococcus(Hemoculture) 四联球菌（Tetracoccus） 八叠球菌（Sarcina） 2、杆菌（bacillus，bacilli） 菌体呈圆柱形或近似卵圆形,杆菌的种类很多，其长短、粗细及显微镜下的形象很不一致。 大肠杆菌 E.coli 沙门氏菌 Salmonella.sp 大肠杆菌(SEM) 沙门氏菌salmonella(SEM) 布氏杆菌Bacterium burgeri G- 产气荚膜梭菌(SEM) 结核杆菌Tbc (SEM) 枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis (SEM) 单核细胞增生性李氏杆菌(SEM) 炭疽繁殖体(SEM) 空肠弯曲杆菌(SEM) 鼻疽杆菌 炭疽杆菌 炭疽杆菌 炭疽杆菌在动物体内的形态 炭疽杆菌 李氏杆菌 鼠伤寒沙门氏菌 (x 20,800) 肉毒杆菌（C. botulinum） 白喉棒状杆菌 大肠杆菌 E. coli (0157:H7 志贺氏痢疾杆菌 (x 22,400) 3、螺旋状菌（spirillum） 菌体呈弯曲或螺旋状的园柱形，两端圆或尖突 又可分弧菌和螺菌两种 弧菌vibrio：菌体只有一个弯曲，呈弧形或逗点状， 螺菌spirillum：菌体较长，有两个以上的弯曲，捻转呈螺旋状 螺旋状菌（spirillum） 霍乱弧菌 (x 15,575) 梅毒螺旋体Microspironema pallidum 钩端螺旋体 二、细菌的结构 习惯上：细菌的结构 革兰氏阴性菌的细胞壁模式图 革兰氏阳性菌和阴性菌细胞壁电镜图 Gram stain of Gram + Staphylococcus cells Gram stain of Gram - E. coli cells 破伤风芽孢杆菌 Bacillus tetani 鞭毛 荚膜普通染色光镜观察 肺炎球菌荚膜 三、细菌的营养 细菌的化学组成：水（70-90%）、固形物（10-30%） 细菌的营养物质：水、糖类、蛋白质、无机盐、生长因子 四、细菌的生长繁殖 条件：营养、温度、酸碱度、渗透压、气体环境 繁殖方式与速度：简单的二分列式。迟缓期、对数期、稳定期、衰老期。 五、细菌的新陈代谢 酶在新陈代谢中作用：胞内酶、胞外酶 呼吸类型，对氧的需求：专性需氧菌、专性厌氧菌、兼性厌氧菌 代谢产物：糖---糖发酵试验、甲基红试验、伏-普试验。蛋白质---吲哚试验、硫化氢试验、尿素试验、硝酸盐还原试验。其他代谢产物：无机酸、有机酸、氨基酸、醇类、脂类、维生素、抗生素、毒素。 第三部分 细菌病的诊断程序 一、诊断的依据畜禽细菌性病少数可根据流行情况、临床症状做出诊断，如破伤风。 畜禽细菌性病多数在流行情况调查、临床症状、病理剖解的基础，结合实验室诊断做出最后确诊。 诊断方法有：显微镜检查（光镜、电镜）、病原的分离培养、血清学抗体检测、病原的分子生物学检测。 二、细菌实验室诊断内容 病料的采集1、病料采集基本原则 采样所用器械应事先消毒。无菌操作贯穿始终。 对急性死亡的动物，从耳尖或四肢末梢血管取血制成涂片，染色镜检，在排除炭疽后方能剖检取样。 要分离病原菌，应采集到含菌最多的组织脏器。采集的病料要尽可能齐全，除了内脏、淋巴结和局部病变组织外，还应采取脑组织和骨髓，以防遗漏。 病料应新鲜，动物死后，应立即采集，夏天不宜超过6-8小时，冬天不应迟于24小时。 采集、包装和送检过程中要注意安全，做好个人防护和环境消毒，防止病原菌的扩散。 做好记录和标记 2、病料采集方法 液体材料的采集 内脏 皮肤及羽毛 胎儿 检出形态与染色上具有特征性的病原菌，有助于病原的初步诊断或确诊，如痰液检出抗酸性分支杆菌 分离培养 在细菌学诊断中，分离培养是不可缺少的一环。 主要是在含许多细菌的病 料或培养物中挑选出某种细菌。