HIV抗体质控血清的制备和使用规程.doc

ICS 点击此处添加中国标准文献分类号 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T XXXXX—XXXX HIV抗体质控血清的制备和使用规程 Codes of making and using for quality control serum of HIV antibody 点击此处添加与国际标准一致性程度的标识 XXXX - XX - XX发布 XXXX - XX - XX实施 中 华 人 民 共 和 国 国家质量监督检验检疫总局发布 前言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局、中华人民共和国北京出入境检验检疫局。 本标准主要起草人:吕洁毅、戴俊、王树祥、丁国允、陈素英、卢林、何振毅。 HIV抗体质控血清的制备和使用规程 范围 本标准规定了HIV抗体质控血清的制备、使用和保存方法。 本标准适用于出入境检验检疫机构对HIV抗体质控血清的制备和使用。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 19489 实验室 生物安全通用要求 JJF 1005-2005 标准物质常用术语和定义（ISO GUIDE 30:1992） JJF 1006-1994 一级标准物质技术规范 WS 293-2008 艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准stability 包装单元(如:瓶,包等)开封后在特定贮存条件下标准物质特性的稳定性。 长期稳定性long-term stability 在标准物质生产者规定贮存条件下标准物质特性的稳定性。 [CNAS-GL29,定义3.11] S/CO值 S/CO value 指ELISA试验测定得到的样本的HIV抗体光密度值与试剂检测的临界值（cut off value）之比，是抗体反应强度的指标，在一定范围内S/CO值越大，说明反应强度越高。 [WS 293-2008,定义2.12] 要求 原料选择 原料选择应符合下列要求： 应满足适用性、代表性、以及容易复制的原则； 原料的基体应和使用的要求相一致或尽可能接近，即收集的原料（血清）应清亮，无肉眼可见的溶血、黄疸、乳糜颗粒或其他杂质； 应具有高度稳定性和适合检测和试验要求的特异性，不应含有干扰使用目的的杂质； 应有足够的数量，以满足在有效期间使用的需要。 质控血清的外观、装量和质量 4.2.1 质控血清应清亮、均匀，无溶血、黄疸、乳糜颗粒和凝块。 4.2.2 质控血清可按1年使用量配置，每瓶装量应不少于每次实验的用量。 4.2.3 质控血清的质量要求应符合《全国艾滋病检测技术规范》第二章中9.1.2.1的规定。 准备 器材 移液器、移液头、移液管、刻度试管、带盖样品杯、灭菌过滤器或注射器、0.2 μm灭菌微孔滤膜（聚醚砜膜-PES）、镊子、吸球。 仪器 酶标仪、洗板机、37 ℃水浴箱、-20 ℃以下非自动除霜低温冰箱。 制备程序 原料的采集和处理 原料采集 主要包括： 正常人血清：从日常检测样品中收集感染性疾病血清学标志物包括HIV-1/2抗体、HIV-1p24抗原、乙肝病毒表面抗原（HBsAg）、丙肝病毒（HCV）抗体和梅毒螺旋体抗体均阴性的血清，或通过合法途径购买正常人血清； 阳性参考品：收集日常检测样品中确证HIV抗体阳性、其他感染性疾病血清学标志物（HBsAg、HCV抗体、梅毒螺旋体抗体）均阴性的血清（仅艾滋病检测确证实验室可收集），或购买阳性对照质控品（包括HIV抗体诊断试剂盒内提供的阳性对照、高浓度外部阳性对照质控品）2 ℃～8 ℃贮存，1周后弃去，。20 ℃以下密闭贮存稳定1年； 质控血清开瓶后在2 ℃～8 ℃贮存稳定1周。 （规范性附录）质控血清均匀性检验 方法 确定抽取样品量，按JJF 1006-1994中4.1和4.2的规定。 确定取样方式，按JJF 1006-1994中5.1和5.2的规定。 按抽取数量抽取分装好的质控血清，按随机次序进行ELISA检测，每瓶检测1次，计算测定的S/CO值的平均值（）、标准差（S1）；另用上述质控血清中的1瓶连续检测相同次数，计算S/CO值的平均值（）、标准差（S2）。 计算瓶间均匀性CV(％)，应满足CV﹤20％的要求（参见4.2.3）。 统计指标计算 统计指标计算见式（A.1）、（A.2）、（A.3）和（A.4）。 (A.1) (A.2) (A.3) (A.4) 当S1<S2时，令CV瓶间=0 式中： ——平均值； n ——测量次数； xi ——指定参数第i 次测量值； S