α1,2-岩藻糖转移酶基因转染增加卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ Lewis y抗原的表达.pdfVIP

维普资讯 中 国 医 学 科 学 院学 报 ACTA ACADEMIAE MEDICINAESINICAE · 论 著 · ， 2-岩藻糖转移酶基 因转染增加卵巢癌细胞系 RMG-ILewisy抗原的表达 林 蓓 ，郝莹莹 ，王冬冬 ，朱连成 ，张淑兰 ，齐藤真木子 ，岩森正男。 中国医科大学 附属盛京医院妇产科，沈阳 110004 Et本东京大学医学部d,JL科，日本东京 113．8655 日本近畿大学理工学部化学科，日本大阪577-8502 通信作者：林蓓 电话 ：024传真：024电子邮件 ：linbei88@hotmail．corn 摘要 ：目的 将人a1，2一岩藻糖基转移酶 (a1，2-ftr)基因转染卵巢癌细胞系RMG-I并探讨细胞表面Lewisy及 其他相关糖脂抗原的变化。方法 采用PCR方法克隆人a1，2-ftI1基因编码区HFU~H，构建表达载体pcDNA3．1(-)． HFU~H，利用磷酸钙法将其转染入卵巢癌细胞系RMG．I，建立Q1，2．ftr基因稳定高表达细胞株RMG．I．H。通过酶活性 测定证明转染前后细胞系a1，2-ftr活性的改变，采用薄层层析、薄层层析免疫染色方法测定转染前后细胞脂质及糖 脂，特别是 Ⅱ型寡糖的变化。结果 基因转染后细胞RMG-I-H中H．1抗原及LewisY抗原显著增加，特别是Lewisy抗原 为转染前的20倍；而 I型糖链Lewisb显著减少。转染前后细胞膜上的主要脂质成分胆固醇和磷脂质的含量没有变化， 且中性糖脂质也没有明显变化。结论 a1，2-ftr基因转染增加a1，2-ftr活性的同时，增加卵巢癌细胞系RMG-ILewisy 抗原的表达；RMG．ILewisY高表达细胞系的建立为研究LewisY抗原与卵巢癌生物学行为提供了细胞模型。 关键词：卵巢肿瘤；ctl，2-岩藻糖基转移酶；基因；转染；Lewis抗原 中圈分类号：R345．5；R344．6 文献标识码 ：A 文章编号：1000-503X(2008)03-0284．06 Transfectionof0c1．2-FucosyltransferaseGeneIncreasestheAntigenic Expre~ionofLewisYinOvarianCancerCellLineRM G-I LIN Bei，HAO Ying．ying ，WANG Dong．dong。 ZHU Lian．eheng ， ， ZHANG Shu．1an ，SAITO Makiko ，IWAMORIMasao DepartmentofObstetricsandGynecology，ShengjingHospitalofChinaMedicalUniversity，Shenyang110004，China DepartmentofPediatrics，GraduateShoolofMedicine，UniversiytofTokyo，Tokyo113-8655，Japan