氯氰菊酯降解真菌的筛选及降解特性的研究.pdf

§ 。㈣ 目录 中文摘要……………………………………………．．I 英文缩略表…………………．………………………．．V I引言……………．………．………………………．’．．1 1 1．1微生物降解农药研究进展………………………………1 1．2微生物降解农药的机理研究…………………………．．．．5 1．2．1农药降解酶的研究…………………………………．5 1．2．2农药降解酶基因的研究……………………………．．．9 l。3氯氰菊酯农药概况…………………………………．．1l 1．3．1氯氰菊酯的基本性质及毒性…………………………．11 1．3．2氯氰菊酯的生态毒理学研究…………………………．12 1．3．3氯氰菊酯的生物降解………………………………．13 1．4研究的内容和意义…………………………………．．15 2材料与方法…．………………………………………17 0菱；≮一0√j● 2．i药品试剂…………………………．………………17 2．2仪器设备…………………………………………．18 2．3培养基……………………………………………18 2．3．1富集培养基………………………………………18 2．3．3无机盐培养基………．．…………………………．．19 2．3．3 PDA培养基……………………………．．………．．19 2．4真菌生长量的测定方法……………．…………………19 2．5氯氰菊酯的提取及测定………………………………．19 2．5．1培养液中氯氰菊酯的提取……………………………19 2．5．2氯氰菊酯的高效液相色谱测定方法……………．．……．．19 ， 2．5．2．1标准溶液的配制和标准曲线的绘制…………．………．19 l 2．5．2．2添加回收率的测定………………………………．20 2．5．3氯氰菊酯降解率的计算……………………………．．20 2．6降解菌的富集与分离…．…………．．…………………20 2．6．I菌种的来源………………………………………20 2．6．2降解菌的富集、分离与纯化…………………………．．20 ．2．1真菌的富集……………………………………．20 ．2．2真菌的驯化……………………………………．21 ．2．3真菌的纯化……………………………………．21 氯氰菊酯高效降解真菌的筛选与鉴定……………………．21 ．1氯氰菊酯高效降解真菌的筛选………………………．．21 ．2氯氰菊酯高效降解真菌的鉴定………………………．．21 氯氰菊酯高效降解真菌降解特性的研究…………………．．21 ．1外加碳源浓度对真菌生长及降解率的影响………………．21 2．8．2初始pH值对真菌生长及降解率的影响…………………．22 2．8．3氯氰菊酯浓度对真菌生长及降解率的影响………………．22 2．8．4培养温度对真菌生长及降解率的影响…………………．．22 2．9真菌TS-203降解酶的研究……………………………．22 2．9．2降解酶的提取……………………………………．22 2．9．2．1胞内酶的提取……………………………………22 2．9．2．2胞外酶提取……………………………………．23 2．9．3降解酶蛋白质含量的测定……………………………23 2．9．3．1蛋白质标准曲线的绘制……………………………23 2．9．3．2降解酶蛋白质含量的测定…………………………．24 2．9．4降解酶对氯氰菊酯的降解实验…………………………24 2．9．5氯氰菊酯降解酶降解特性的研究………………………24 2．9．5．1温度对对氯氰菊酯酶促降解的影响…………………．．