紫外线诱变选育硒酵母及其培养条件的研究.pdfVIP

摘 要 硒是生物体必需的微量元素，具有很多生物学功能。谷胱甘肽过氧化物酶催 化谷胱甘肽参与过氧化反应，清除过氧化物的毒害，硒是保持谷胱甘肽过氧化物 酶活性的必要成分。但是无机硒的吸收率低、毒性大。酵母菌对微量元素具有很 强的吸附作用，可以作为微量元素良好的载体，将无机硒转化成有机硒，提高硒 在机体内吸收利用率，降低其毒副作用，且酵母本身含丰富的蛋白质和B族维 生素，是一种良好的微生物蛋白饲料营养源。所以，获得高产富硒酵母的关键就 在于拥有一株好菌株并找到适合的培养条件。本试验就是利用紫外线照射诱变， 进行抗性筛选高产突变株，并确定制备富硒酵母的最佳条件。 实验以热带假丝酵母(Candida 诱变，酵母经紫外线诱变，其致死率曲线表现为“肩形”，即经小剂量辐射的酵 母细胞致死率较低，而大剂量的辐射会使酵母细胞的致死率明显丹高。随着辐射 时间的累计，辐射剂量的增加，突变率逐渐提高，但照射到一定程度时，突变率 会降低。筛选出20株生长快、菌落大的突变菌株，接种子含有不同【s门的平板 培养基，进行梯度抗性筛选，得到耐高浓度硒的能力较强的菌株6株，进一步复 筛得到突变株Y-5。结果显示：Y-5的生物量和硒含量分别由原来的 0．619 g／lOOmL、688mg／kg提高到0．779 验摸索出了Y-5培养条件：11Bo的麦芽汁培养基为最适培养基，发酵培养时间为 10％，装液量为250ml的锥形瓶中装60ral。然后选出对硒含量影响较大的3个 因素进行正交试验，找到最优组合为培养基含硒量20I．tg／ml，发酵培养时间为 35h，接种量10％。在最优条件下培养的突变株Y-5，生物量提高了58％，硒含 能稳定。 本试验对富硒酵母中有机和无机硒进行测定，发现筛选菌株Y-5有机硒含量 达93．6‰而出发菌的有机硒含量是80％。 关键词：紫外线，诱变筛选，富硒酵母，生物量，硒含量，条件优化 Abstract Seleniumisanessentialtraceelementof animals，whichhasa of deal great effects．Seleniumisanessential to the of biological component keep activity whichCan to giutathioneperoxidase catalyzeglutathione participatingperoxidation ridofthe of the rationof get toxicityperoxide．Howeverabsorption inorganic islow seleniumbut isa carrieroftraceelementbecauseof hi曲toxicity．Yeastgood its to element．Itconvert trace Can the seleniumto adsorption strong inorganic organic call the ration an