牛卵母细胞及胚的玻璃化冷冻研究.pdfVIP

摘要 本实验对牛卵母细胞在成熟培养时间、玻璃化液处理时间、玻璃化载体、所带颗粒 细胞层数、玻璃化液及浓度5个方面进行了比较选择，优化了牛卵母细胞的玻璃化冷冻 保存方法。本实验还对牛胚胎在发育阶段、玻璃化冷冻载体的玻璃化冷冻效果进行了研 究。(1)体外成熟培养22h后的牛母细胞冷冻效果较好，其冷冻解冻体外受精后的卵裂 理30S的玻璃化冷冻效果较好，其冷冻解冻体外受精后的卵裂率及囊胚率分别为41．18 作为卵母细胞的载体进行玻璃化冷冻效果比较后发现：玻璃oPs管和塑料0Ps管冷冻 效果较好。三种载体的卵母细胞解冻后无论体外受精的卵裂率还是囊胚率均无显著差异 0．05)(4)保留2～3层颗粒细胞的卵母细胞玻璃化冷冻的冷冻效果较好，其冷冻解冻体 外受精后的卵裂率和囊胚率分别为40．13％和15．13％。囊胚率方面：2～3层颗粒细胞组 与不含颗粒细胞组差异显著(pO．05)，2～3层颗粒细胞组与完整颗粒层组差异均不显 差异最著(p0．05)，含2～3层颗粒细胞的卵母细胞的卵裂率与不含颗粒层的卵母细胞 差异极显著(p0．01)。(5)通过两种冷冻保护剂及不同配比浓度玻璃化冷冻牛卵母细 胞解冻后体外受精的卵裂率，体外培养的囊胚率的对比得出EDFS30这种组合及配比浓 度的牛卵母细胞玻璃化冷冻效果较