多杀菌素分离纯的工艺研究.pdfVIP

多杀菌素分离纯化的工艺研究 摘要 spinosa)发酵产生的次生代谢产物，它具有高效、低毒、低残留和对环境友好等优 点。本课题主要目的就是运用溶剂萃取法和树脂吸附法从发酵液中提取多杀菌素， 确定较为合理的工艺方法和参数以及分离纯化工艺路线。 首先，本文建立了关于多杀菌素的快速定量分析检测方法，包括薄层层析法和 高效液相色谱法。其中建立的高效液相色谱法具有快速、准确等特点，适用于测定 发酵液及各种分离过程中的多杀菌素的含量。其最佳色谱条件如下：色谱柱：碳十 八烷基硅胶键合柱；流动相：甲醇：乙腈：水(含O05％乙酸铵)=49：49：2；检测 波长：246rma：流速：lml／min；进样量：lOI．tl；柱温：室温。 在溶剂萃取法中，优化后的条件为：发酵液调至pH9．0，加入等体积丙酮，浸提 8h，离心后取上清液，经减压浓缩后，再以等体积的乙酸乙酯萃取三次，再次浓缩 到1／3的原体积时，用o 2mol／L的酒石酸溶液反萃取，得到的水相调pH为9．0时析 出固体，真空干燥得到多杀菌素成品。 在树脂吸附法研究中，筛选出非极性的XAD．4树脂作为吸附剂，优化后的吸附 达1．09X