三体综合征产前摘要.pptVIP

21三体综合征产前诊断 201208010301 郑丽 产前诊断定义： 产前诊断始终遗传咨询的基础上，主要通过遗传检测和影像学检查，对高风险胎儿进行明确诊断，通过对患胎的选择性流产达到胎儿选择的目的，从而降低出生缺陷率，提法哦优生质量和人口素质。产前诊断又称宫内诊断，它是为了了解胎儿在子宫内的健康，有无先天性畸形和遗传病，用某些特殊方法在子宫内对胎儿进行诊断，以便及早采取措施避免残疾胎儿的出生，提高出生人口的素质，是优生学的重要组成部分。 21三体综合征 属于常染色体病，为多了一条21号染色体导致，又称Down’s综合征，先天愚型 新生儿发病率为1/800，男性患儿多于女性 案例1 张某，女，31岁，商场收银员，怀孕十五周，，担心所怀胎儿不正常，前来进行产前咨询。咨询得知张某一姐姐曾生育一智力低下儿子，经某医院诊断为先天愚型，但具体核型不详。张某孕前检查各项优生指标均正常，孕前无感冒服药史，无有毒有害物质接触史。张某丈夫，32岁，司机，有烟酒嗜好，在妻子怀孕前半年已戒酒，减少吸烟量。两人核型检查均正常，家族中无其他特殊疾病患者，根据张某的情况，做孕中期唐筛，结果张某血清的AFP,hCG和uE3检查结果阳性，再进行B超检查胎儿情况，证实胎儿胎龄正确，发育正常。根据上述资料，张某所孕胎儿具有21三体综合征的高风险，建议进行 产前诊断。 AFP：甲胎蛋白 uE3:非结合雌三醇 21三体综合征 hCG: 35以下孕妇检出率57% 现认为β-hCG作为总hCG的亚单位，对先天愚型胎儿筛查意义更大 产前诊断的方法 非侵袭的：超声波、X线、CT、磁共振等 绒毛吸取术（8-12周） 羊膜穿刺术（16-20周） 侵袭性的： 脐带穿刺术（17-32周） 孕妇外周血分离胎儿细胞 胎儿镜 羊膜穿刺术 原理：羊水中有一定数量胎儿脱落细胞，通过羊膜穿刺获取羊水中的胎儿细胞，经体外培养后通过G显带实验进行核型分析，判断染色体是否畸形从而诊断21三体综合征。 G显带：指将染色体标本经碱、胰蛋白酶或其他盐溶液处理后，再用Giemsa染液染色，染色体上出现深染及浅染的横纹。 实验材料、试剂、器材 1、药品：pH6.8 PBS, Giemsa , 0.025%胰蛋白酶（取0.9%氯化钠100ml，加0.25%胰蛋白酶1ml） 2、器材：离心管、离心机、天平、37摄氏度温箱、载玻片，盖玻片、恒温水浴箱、标本、光学显微镜、玻璃铅笔、定时钟、染色缸、直柄虹膜镊、滴管 实验步骤 1、取材 A、腹部备皮，排空膀胱，平卧位常规消毒后铺无菌洞巾 B、麻醉。一般不需要，精神紧张者或可用普鲁卡因或利多卡因麻醉。 C、选择穿刺部位，B超胎盘定位后避开胎盘 D、抽取羊水 E、穿刺完成后拔出穿刺针，局部压迫5分钟，穿刺部位敷无菌纱布，胶布固定 穿刺部位的选择 1、中期妊娠：选择耻骨联合上3横指，于腹中线或其左右侧旁，扪吉囊样感的部位做穿刺；也可在宫底与耻骨联合连线中点或左右任何一侧穿刺。 2、晚期妊娠：先扪清胎先露，然后上推先露部，在先露下方穿刺；也可在胎儿颈背部空隙处或胎儿肢体侧空隙处穿刺。 穿刺过程 在B超定位下，以20-21号腰椎穿刺针垂直刺入腹壁，通过腹壁和宫壁两次阻力，当有落空感使进入羊膜腔，抽取芯针，见羊水溢出，接注射器，抽取清亮羊水20-30ml，送检 注意：如果抽取失败或有母血感染，可隔一周再穿刺抽取。 穿刺时间及风险估计 抽取羊水最佳时间是妊娠16-20周 原因：此时羊水量多，胎儿浮动，穿刺时进针容易，且不易伤及胎儿 风险：引起流产的风险为0.5%，母体感染，RH溶血和其它妇科合并症发生率低。 细胞体外培养 无菌超净台上将羊水注入50ml无菌离心管内，1500r/min常温离心10min，移去上清，留约0.5ml上清液，枪尖混匀，分装吸取至3个60min培养皿，每皿添加4ml羊水完全培养基，37摄氏度5%CO2培养箱中培养6-7天。 制片 培养6-7天后，倒置显微镜观察细胞生长情况 有若干梭形发育良好细胞克隆生长，更换新鲜培养液，观察 2-3天后细胞岛长成细胞融合度达70-80%较大克隆，出现数目不等圆形类圆形透亮细胞时，可收获 收获是更换培养液，加秋水仙素0.1微克每毫升，4-4,5h，镜下大量“鱼眼样”透明细胞，收获 吸取培养上清至一新离心管，加入0.25%胰酶，