大肿瘤基因tm的rnai载体构建及其对毛白杨的遗传转化.pdf

摘要 RNAi是最近几年发展起来的研究生物体基因表达调控与功能的一项崭新的基因 沉默技术，是由小干扰RNA(small interfering 其降解，从而阻止了mRNA的翻译。 植物根癌病世界各地均有发生，在我国也广泛的存在。其病原致瘤农杆菌 [Agrobacteriummme 有广泛的致病性。杨树是我国北方重要的城市绿化和造林树种，是致瘤农杆菌危害林 木树种之一。在受到农杆菌侵染后，植株的根部、根茎处甚至茎上形成大小不一的肿 瘤，感病植株生长迟缓，树势弱，产量少，寿命短，降低木材产量的同时，也带来了 巨大的经济损失。因此采用先进的技术手段，从基因工程的角度来抑制肿瘤发生，研 究肿瘤发生机制，这对于植物根癌病的防治、瘿木的开发利用等均具有重要的理论和 应用价值。 以野生根癌农杆菌I型中克隆得到的523bp长度的tml基因为目的基因，利用中 架通过组成型启动子CaMV35S启动，另外此载体带有真核内含子的GFP标记基因， 转基因植物可通过荧光鉴定。 选用培养基MS+6-BAI．0 mg／L+NAA0．05