河北杨巯基蛋白抑制剂基因的分离和功能鉴定.pdf

摘 要 摘 要 基因控制技术是森林有害生物综合治理(IPM)控制策略的核心技术之一，发现具 有自主知识产权的功能基因是实现这一技术的关键和基础，巯基蛋白酶抑制剂(cysteine inhibtor， proteinase CPI)是一类广泛存在于动植物和微生物体内的一个超级族，由于 CPI能够有效地抑制昆虫中肠的巯基蛋白酶的水解作用而达到杀虫的目的，因此，巯基 蛋白酶抑制剂已被广泛地应用于抗虫基因工程中。天牛类害虫作为我国林业上重大的森 林有害生物，危害极其严重。天牛属于鞘翅目害虫，主要利用消化道内的巯基蛋白酶来 其应用到天牛的抗虫基因工程中，将是一种有效的控制天牛措施。本研究选用我国抗天 牛的乡土树种河北杨为研究对象，首次应用RT-PCR方法从河北杨形成层中分离和克隆 检测的真核表达重组蛋白，在此基础上对该基因进行了抗虫性的功能鉴定，主要研究结 果如下： 1． 应用RT-PCR技术从河北杨形成层中分离和克隆了CPIeDNA编码区段。序列 基酸残基，此序列具有典型的植物巯基蛋白酶抑制剂的保守序列。在此基础上，为获得 更长的CPI