rhil-18原核表达、纯化及抗肿瘤研究.pdfVIP

人白细胞介素．18的原核表达、纯化及抗肿瘤研究 中文摘要 目的： 探索提高人IL．18在原核细胞中的表达和纯化效率的方法并进行 IL．18的抗肿瘤初步研究。 BamHI酶切后回收大片段；将大小片段的酶切产物用T4DNA连接酶进行 组质粒转化到大肠杆菌DH5Q感受态中，将转化好的菌液铺于含氨苄青霉 素的琼脂平板表面培养lO～14h，然后从琼脂平板中挑取阳性克隆于LB a PBV220／rhIL一18重组质粒的大肠杆菌DH530。C分别培养，42℃分别诱 G．50 白的表达量。(4)破碎菌体，洗去杂蛋白，溶解包涵体。过Sephadex 的IFN-Y的诱生作用及对NK细胞杀伤活性促进作用的测定。(8)检测 rhIL一18在体外对人慢性骨髓性白血病细胞K562和肺癌细胞A549、 NCI。H446生长的影响。 进行IL一1 8基因序列测定，测序结果与文献报道的人IL．18的成熟肽的基因