两种泥鳅中cy19基因的克隆与时空表达.pdfVIP

摘要 鱼类的性别分化易受发育环境的影响。泥鳅(^姆，r”螂口掣肋∞z“幼螂)和大鳞副泥鳅 (P(阳删堙咿H螂如6rm疗埘)为我国重要的广布性经济鱼类，属鲤形目鳅科。向性成熟的两种 泥鳅个体注射绒毛膜促性腺激素，获得卵子和精子进行人工授精。把胚胎分别置于20℃、 25℃和30℃条件下，使其发育。经性腺检查发现随着温度的升高两种泥鳅中雄性个体所占 的比例明显升高，获得了明显的偏雄性比率群体。 根据已知硬骨鱼细胞色素P450芳香化酶cyP』9基因序列设计两套嵌套简并引物，用 含子和3个外显子，编码的蛋白质序列长84氨基酸残基；而两种泥鳅的C冲』96基因均包 含三个内含子和四个外显子，编码的蛋白质序列长145氨基酸残基。 以剑PD日基因为参照，分别对2种泥鳅成体组织和不同发育阶段的胚胎进行了 组织中具有大致相似的表达模式，在卵巢和脑组织中表达量较大。在精巢和肝组织中微量 表达；在胚胎中二者的表达模式差异较大，泥鳅cJ，PJ如在原肠期表达量最高，其次是神 经胚、尾芽期，大鳞副泥鳅c”J鲍在卵黄吸收期表达量最高，其次是原肠期、神经胚。 而c』妨基因在两种泥鳅中的表达模式差异较大，如：泥鳅c，PJ妨基因只在成体泥鳅 卵巢、肾以及胚胎的原肠胚和神经胚中表达。 大鳞副泥鳅CyP，96