核酸检测技术在本血吸虫感染宿主早期诊断及疗效考核中的应用研究.pdfVIP

核酸检测技术在日本血吸虫感染宿主早期诊断及疗效考核中的应用研究 中文摘要 中文摘要 本研究拟在课题组在已成功建立PCR法检测日本血吸虫特异性DNA的研究 基础上，进一步探索核酸检测技术在日本血吸虫病早期诊断及疗效考核中的应用。 首先验证了PCR法对日本血吸虫感染家兔模型的不同组织样本(包括日本血吸虫 成虫、虫卵、感染家兔的肝组织、粪便和外周血清)中日本血吸虫特异性DNA 的检测结果，且进一步确定了PCR法检测的敏感性和特异性，结果显示其敏感性 为80彰旺的DNA水平，所检测的DNA片段是日本血吸虫特异的，与曼氏血吸 虫及华支睾吸虫均无交叉反应。对感染家兔的血清DNA的检测结果证明了PCR 法对日本血吸虫感染的早期诊断和疗效考核价值，即可从感染后第1w的血清中 扩增出特异条带，于治疗后第12w即转为阴性，与以往研究结果基本一致。 在已建立的PCR法的基础上，本研究进一步建立了一种新型快速、灵敏的核 酸检测法，即环媒介导的恒温扩增法(简称L√d①口法)，并与PCR法比较检测的 敏感性和特异性，结果表明，I．AMP法的敏感性显著高于PCR法，约为PCR法 睾吸虫的交叉反应。在日本血吸虫感染家兔模型的早期诊断和疗效考核的实验中