ELISA试剂的选用和质检解读.pptVIP

目前试剂盒存在的问题--HBsAg 检测灵敏度 据文献报道，到目前为止在献血员中所发现的HBsAg 携带者最低含量为0.2 ng/ml。 病毒变异 个别关键的氨基酸的替代变异，足以改变HBsAg 的构型，从而改变其抗原特性 不同亚型 试剂盒临床试用评价 试剂盒临床试用评价 试剂盒临床试用评价 ELISA试剂的选用和质检 卫生部临床检验中心 王露楠 影响试剂盒质量的因素 试剂盒的选用 试剂盒的质检方法 目前试剂盒存在的问题 影响试剂盒质量的因素 1．原材料 (1)固相材料 商品ELISA试剂盒中基本上都使用聚苯烯塑料微孔板，其对ELISA试剂盒的影响在于孔间的显色差异。 (2)抗原 --自然抗原、合成抗原和基因重组抗原。 纯 度：纯度不高可致试剂盒的特异性不强。 立体结构：合成抗原一般都是多肽抗原，缺乏完整抗原所具有的立体结构决定簇，用于相应的抗HCV和抗HIV抗体的检测有可能导致结合上述决定簇的抗体漏检。 影响试剂盒质量的因素 (3)抗体 多克隆抗体(多抗)：制备简单，含针对抗原的多种决定簇，但抗体的亲和力和特异性相对要低于单抗，且每次制备的抗体在其亲和力和特异性上均有区别。 单克隆抗体(单抗)：可无限大量的得到针对单一决定簇的抗体，缺点是结合的单一性。当建立双抗夹心ELISA测定方法时，如包被和指示抗体使用同一单抗，则由于结合位点的缺乏，很