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临界氧浓度。

一 临界氧 发酵生产中用空气饱和度百分数来表示溶氧浓度。 临界氧浓度:不影响呼吸所允许的最低溶氧浓度,如对产物而言,便是不影响产物合成所允许的最低浓度。 某些微生物的临界氧浓度 不同种类的微生物的需氧量不同,一般为25~100 mmolO2/(L·h),同一种微生物的需氧量,随菌龄和培养条件不同而异。菌体生长和形成代谢产物时的耗氧量也往往不同。 微生物菌体在不同时期不同阶段的耗氧速度[ mmolO2/(L·h)] 当不存在其他限制性基质时,溶解氧浓度高于临界值,细胞的比耗氧速率保持恒定; 如果溶解氧浓度低于临界值,细胞的比耗氧速率就会大大下降,或者是微生物的呼吸速率随溶解氧浓度降低而显著下降,细胞处于半厌气状态,代谢活动受到阻碍。   合成的临界氧值: 考察不同溶氧浓度对生产的影响,便可求得合成的临界氧值。 注意: ●实际上,呼吸临界氧值不一定与产物合成临界氧值相同。 ●生物合成临界氧浓度并不等于其最适氧浓度。 ●在培养过程中并不是维持溶氧越高越好。过高的溶氧对生长可能不利。 空气分布器 发酵罐中装有多孔分布器和单孔分布器,在气流速度很低时,多孔分布器有较高的通气效率。但两者的区别随着气流速度的增加而逐渐减少。 可能是低气流时多孔分布器可形成更大的传递面积,而当通气量增大时,单孔分布器能更大的增加发酵液的湍动程度。 2、影响微生物耗氧的因素  微生物的“需氧” 可用耗氧速率或呼吸强度来表示:   耗氧速率(oxygen uptake rate :指单位体积的培养液在单位时间的耗氧量。单位为 mmol O2/ L· h ,用 r表示或OUR 呼吸强度(respiratory strength :单位质量的干菌体在单位时间的耗氧量。单位为 mmol O2/ g ·干细胞 ·h ,用Qo2表示   两者的关系:  ③菌龄:幼龄菌生长旺盛,耗氧大 ④发酵条件:pH、温度 ⑤代谢类型: 若产物通过TCA循环获取,则耗氧大;若产物通过EMP途径获取,则耗氧量小 * * 溶氧 DO 是需氧微生物生长所必需。在发酵过程中有多方面的限制因素,而溶氧往往是最易成为控制因素。 在28℃氧在发酵液中的100%的空气饱和浓度只有0.25 mmol.L-1左右,比糖的溶解度小7000倍。在对数生长期即使发酵液中的溶氧能达到100%空气饱和度,若此时中止供氧,发酵液中溶氧可在几分钟之内便耗竭,使溶氧成为限制因素。 第六节 溶氧 DO 对发酵的影响及控制 各种微生物的呼吸强度是不同的,并且呼吸强度是随着培养液中溶解氧浓度的增加而加强,直至达到一个临界值为止。这个临界值称为“临界氧浓度”。 微生物的临界氧浓度大约是饱和浓度的1%~25%。 1.8~4.9×10-2 8.2×10-3 3.1 ×10-3 1.5 ×10-2 9 ×10-3 4.6×10-3 3.7×10-3 2.2 ×10-2 9×10-3 30 37.8 15 31 30 34.8 20 24 30 固氮菌 大肠杆菌 大肠杆菌 粘性赛氏杆菌 粘性赛氏杆菌 酵母 酵母 橄榄型青霉菌 橄榄型青霉菌 C临界/ mmol/L 温度/℃ 微生物名称 谷氨酸生产菌 50 13 20 50~55 黑曲霉 发酵13h 种子培养7h 产α-淀粉酶 生长 呼吸临界氧值可用尾气O2含量变化和通气量测定,也可用溶氧电极测定。 方法:通气搅拌,溶氧升到最高;中止通气,继续搅拌,顶部充氮气,溶氧迅速下降。 各种微生物的呼吸临界氧值: 细菌和酵母:3~10% 放线菌:5~30% 霉菌:10~15% 二 发酵过程中的溶氧变化 (一)、发酵过程中溶氧浓度变化的一般规律 发酵前期:由于微生物大量繁殖,需氧量不断大幅度增加,此时需氧超过供氧,溶氧明显下降 发酵中期:溶氧浓度明显地受工艺控制手段的影响,如补料的数量、时机和方式等 发酵后期:由于菌体衰老,呼吸减弱,溶氧浓度也会逐步上升,一旦菌体自溶,溶氧就会明显地上升 (二)、溶氧异常的原因 1、引起溶氧异常下降的可能原因 (1)污染好气性杂菌,消耗大量溶氧,使溶氧在短时间内下降到零附近 (2)菌体代谢发生异常现象,需氧要求增加,使溶氧下降 (3)某些设备或工艺控制发生故障或变化,也能引起溶氧下降,如搅拌功率消耗变小或搅拌转速变慢、消沫油因自动加油器失灵或人为加量过多 、停止搅拌、闷罐(关闭排气阀)等。 2、引起溶氧异常上升的可能原因: (1)污染烈性噬菌体 (2)菌体代谢出现异常,耗氧能力下降 (3)补料时间和间隔不当:赤霉素发酵发酸现象 根据发酵液中的溶解氧浓度的变化来判断微生物生长代谢是否正常,工艺控制是否合理,设备供氧能力是否充足等问题,有助于查找发酵不正常的原因和控制好发酵生产。 (三) 溶氧浓

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