百草枯血及尿中浓度检测.pdfVIP

百草枯的血及尿中浓度的检测 杜有功 (浙江省台州医院) 由于百草枯的高效快速的除草能力，而且进入土壤后会很快失活，因而被农业中广泛使 用，随之中毒事件也人益增多。百草枯中毒目前尚无特效的解毒药物且病死率较高，可达 80%左右，血、尿浓度与救治效果的成活率非常相关。据报道如果血中浓度3mg/L时，无论 【1】 中毒时间多长，虽然进行多次的血液透析（Hd）或血液灌流（Hp）仍不能改变患者的预后 。 血、尿中的浓度还可提示预后，在开始 24h 内尿中浓度1mg/L 时提示预后恶劣，甚至比血 浆中的浓度更早提示预后，因此对指导抢救措施过程中具有重要意义现将百草枯在血及尿中 的较为简单的检测方法作一简介。 1. 百草枯的分光光度法测定 百草枯的分子式我 C H N Cl，分子量257.2，纯品为白色结晶，以阳离子形式存在，易 12 14 2 溶于水，微溶于乙醇，3000C 左右分解，在酸性及中性溶液中稳定，可被碱水解，常用的为 20%水溶液。由于百草枯在碱性条件下与连二亚硫酸钠显蓝色，可于 396nm 作比色测定，仪 器简单，方法快速可靠，适用于基层医疗机构使用。 【2】 1.1 第一法 .工作曲线：取百草枯标准应用液【用市售百草枯（20%即 200mg/ml）用去离 子水逐级稀释为 40μg/ml 浓度】0，0.05，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50ml 于 7 只 10ml 比色管中，各管中加去离子水至 2.5ml，再加 2.5ml 正常人尿，摇匀，为 0，0.4，0.8，1.6， 2.4，3.2，4.0 μg/ml 的百草枯标准管。向各管中加 0.3g 无水碳酸钠，0.1g 碳酸氢钠，摇 匀，用慢速定量滤纸过滤于另外 7只试管中，加入 0.05g连二亚硫酸钠，摇匀，用分光光度 计于 396nm波长下，1cm比色皿，以水为参比测出吸光度，减去空白吸光度为 y,百草枯的浓 度我 x，求取标准曲线的回归方程。 样品测定：取 2.5ml 待测尿样于试管中，加入 2.5ml 水，加0.3g 无水碳酸钠，0.1g碳酸氢 钠，摇匀，用慢速定量滤纸过滤于另一试管中，于 396nm 处比色，所得我尿样的空白吸光度 A0,将比色皿中的溶液倒回原试管中，加入 0.05g 连二亚硫酸钠，摇匀，再于 396nm处比色， 得样品的吸光度 A 。（A -A ）通过回归方程得到的值乘以 2即为百草枯的浓度。 样 样 0 注意事项：1.1.1 pH 应大于 9. 1.1.2 显色时间与显色的稳定性 样品加入连二亚硫酸钠摇匀后立即比色,以后每隔两分钟测定一次吸光度, ,加入显色剂后 立即比色,溶液的吸光度最大,随着放置时间的延长,溶液的颜色逐渐褪去,不同的尿样其显 色稳定性不同,有的尿样显色后放置3 h,其吸光度下降10%左右,有的尿样则在放置4 min 后 吸光度即下降6% ,因此,无论是标准还是样品,在过滤后,均应先测定各自的空白吸光度,然 后加入显色剂摇匀后立即比色。 1.1.3 工作曲线、线性范围和检测限按实验方法,分别对每份百草枯的标准液平行测定3次, 取其平均值,绘制标准曲线。标准曲线在0～4.0μg/ml的范围内呈线性关系, r = 0.9991, 回归直线方程Y = 0.15408X -0.00267。方法的检出限为0.15μg/ml,尿样的最低检出浓度为 0.15μg/ml。 1.1.4 精密度试验 用正常人尿样,配制了含有高、中、低3个浓度百草枯样品,分别进行6 次重复测定,计算方法的精密度,其精密度分别为5.2%、2.1%、4.5%。 1.1.5 回收率：回收率在96.5% ～103.0%。 1.1.6 样品的测定 取待测尿样,按照实验方法进行测定,样品浓度为测定值乘以2 (稀释 457 倍数) 。正常人尿液未检出,一例百草枯中毒病人喝一口(约10 ml)后咽下, 4 d 后其尿百草 枯为0.71μg/ml;另一例病人用百草枯兑油抹四肢一次, 4 d 后引起肾衰和呼吸衰竭住院, 6 d后其尿百草枯浓度为4.8μg/ml, 10 d后其尿百草枯为1.4μg/m