用鼠尾胶原建立滴肿瘤药敏检测技术及在宫颈癌的初步应用.pdfVIP

摘 要 目 的： 用自制鼠尾胶原建立胶滴肿瘤药敏检测技术(collagen gel droplet culture-drug sensitivity test, CD-DST) ，探讨该技术在肿瘤药物敏感性检测中的应用价值，从而为临床化疗方案的筛选提供一条 有效途径。 方 法： 首先，构建体外细胞培养的三维立体模型，即将 Hela 细胞加至由自制鼠尾胶原、10×F12 培养 基以及0.5 mol/L 的NaOH 溶液混合形成的胶原混合液中并使其凝固，形成利于细胞生长的鼠尾胶原 凝胶滴，并观察培养在此模型内细胞的生长形态与二维培养形态学上的不同；进一步，建立胶滴肿 瘤药敏检测技术（CD-DST ），该技术主要包括Hela 细胞在胶滴内培养、化疗药物处理、无药培养 和图像分析四部分内容，同时与MTT 检测法进行相关性比较；最后，将该技术初步应用于 12 例活 检宫颈癌标本的体外药敏检测。 结 果： 1、细胞- 鼠尾胶原混合液置于37℃，CO2 体积分数为5%的饱和湿度培养箱中15 min 即可凝固， 形成鼠尾胶原凝胶滴（即三维立体模型），培养在其内的 Hela 细胞生长良好，呈克隆样增殖，细胞 以团块状分散在胶滴内；二维培养的细胞呈不规则多边形，以单细胞形式平