组织原位双重标技术检测fas-fasl系统在结肠腺癌早期诊断中的研究.pdfVIP

组织原位双重标记技术检测Fas-FasL 系统在 结肠腺癌早期诊断中的研究 摘 要 目的：本实验采用Fas 、FasL 免疫组织化学染色和TUNEL 法细胞原位 凋亡染色双重标记，主要探讨结肠粘膜上皮细胞恶性转化过程中，不同时相 Fas 、FasL 的表达情况；Fas 、FasL 的表达与结肠腺癌细胞和局部肿瘤浸润淋 巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte，TIL)凋亡之间的关系以及与结肠腺癌生 物学行为之间的关系。方法：收集结肠手术切除标本和相应的临床资料，分 为四组：正常结肠粘膜上皮9 例；结肠良性增生性息肉20 例；结肠腺瘤(包 括 I 、II 、III 级不典型增生)44 例；结肠腺癌 50 例。应用免疫组织化学法检 测结肠粘膜上皮细胞和TIL 中的Fas 和FasL 表达，不复染细胞核，不封片， 再用 TUNEL 法检测凋亡的结肠粘膜上皮细胞和 TIL ，分别用辣根过氧化物 酶和碱性磷酸酶两种酶系统显色，实现在同一结肠组织切片上同时从蛋白水 平和 DNA 水平观察相关抗原的表达情况和凋亡细胞的形态特点，并结合计 算机图像分析处理系统，定量癌细胞和TIL 的凋亡指数（ap