日本血吸虫病表疫苗研究.pdf

摘要 本文着重于日本血吸虫(Sjaponicum)表位疫苗的研究，包括 以下两个部分： 一 日本血吸虫有效抗原表位的筛选 为分离鉴定日本血吸虫铁蛋白(SjFer)抗原分子的模拟表位并测 定其免疫保护性，本研究用SjFer免疫血清对噬菌体随机12肽库进 行3轮亲和筛选，用ELISA和Western blotting鉴定阳性克隆。对 6个阳性克隆进行测序，并用获得的不同序列的噬菌体克隆免疫昆明 小鼠以测定其免疫保护性。经三轮亲和筛选后，特异性噬菌体得到了 有效富集；6个随机挑选的噬菌体克隆均为阳性；对6个阳性克隆测 序得到3种氨基酸序列；三种序列的噬菌体克隆均能诱导出显著的抗 日本血吸虫的免疫保护性，减虫率分别为26．7％、20．5％、和26．O％， 抗原表位，它们都具有部分的免疫保护性。 为了分离鉴定日本血吸虫85kDa金属蛋白酶的模拟表位，并探讨 其对小鼠的免疫保护效果，本研究用85kDa金属蛋白酶免疫血清筛选 噬菌体十二肽库；用噬菌体ELISA、DNA测序，Westernblot，酶活 性中和实验等方法对所挑取的克隆进行分析，并用动物实验测定其免 疫保护效果。研究发现，随机挑取的10个克隆经ELISA鉴定均为阳 性；测序后得到5种不