cygb在胃癌表遗传性表达沉默的研究.pdfVIP

·中文论著摘要· OYGB在胃癌中表遗传性表达沉默的研究 目 的 肿瘤抑制基因的表达沉默在胃癌的发生发展中起重要作用，而DNA甲基化是 肿瘤抑制基因表达沉默的主要原因之一。本文探讨胃癌细胞中CYGB基因在mP,NA 水平的表达及与DNA甲基化和组蛋白去乙酰化的关系。 材料与方法 一、细胞株 MGC803，AGS，MKN45，HGC27)。 二、实时定量RT-PCR 实时定量PCR数据，以GES-1中的表达量为相对标准，其他6个细胞株中的表达 量与其比较。 三、甲基化特异性P俅 DNA采取经典的有机溶剂法提取，然后行重亚硫酸钠修饰、纯化、回收，回收 的DNA用甲基化特异性引物和非甲基化特异性引物分别行甲基化特异性PCR，对 PCR结果进行电泳分析，判别每一种细胞株中CYGB基因启动子区的DNA甲基化状 态，分非甲基化(U)、部分甲基化(P)、高甲基化(M)三种状态。 四、药物干预实验 以去甲基化药物和／或组蛋白去乙酰化酶抑制剂对MKN45细胞株进行药物干 预，以不加任何一种药物的HGC27作为对照组，其他应用任何一种药物的为实验 组为相对标准，其他实验组与其比较，用2