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中华肿瘤投稿版肺炎衣原体感染在H...doc
肺炎衣原体感染在HEp-2细胞黏附和迁移中的作用*
张利军 洪莉 陈宁 沈炳玲 邓艳秋 权伟 王蓓蓓 张丽莙
【摘要】 目的 观察肺炎衣原体(C.pn)感染在人喉癌细胞系(HEp-2)细胞黏附和迁移中的作用,以期阐明C.pn感染在肿瘤转移中的作用及机制。方法 C.pn增殖培养后感染HEp-2细胞, 光镜下观察细胞病变,吖啶橙染色观察细胞内C.pn包涵体的形态特点,透射电镜观察C.pn包涵体超微结构。细胞黏附实验观察C.pn感染对HEp-2细胞黏附能力的影响。创伤修复实验和Transwell实验检测C.pn感染HEp-2细胞后,细胞迁移能力的改变。结果 C.pn感染HEp-2细胞72 h后,细胞内的空泡状结构即包涵体几乎占据整个胞浆。吖啶橙染色结果显示,细胞内的包涵体呈黄绿色葡萄串状。透射电镜观察到包涵体内成熟的梨形原体(EB)明显增多,而圆形的网状体(RB)则较少。细胞黏附实验结果显示,C.pn感染HEp-2细胞2 h后,C.pn感染组黏附细胞的吸光度(A)值0.669±0.011,明显高于对照组的0.558±0.005(P0.001),C.pn感染组的细胞黏附率为119.89%。创伤修复实验结果显示,C.pn感染HEp-2细胞24 h后,细胞向划痕中央迁移的距离明显长于对照组(P0.05)。Transwell实验结果显示,C.pn感染HEp-2细胞12 h后,C.pn感染组的细胞迁移数目明显多于对照组(P0.001)。结论 C.pn感染能增强HEp-2细胞的黏附能力,同时还能促进HEp-2细胞迁移,提示C.pn感染可能在喉癌转移过程中起促进作用。
【主题词】 喉肿瘤;肺炎衣原体;细胞黏附;细胞迁移;肿瘤转移
Role of Chlamydia pneumoniae infection in HEp-2 cell adhesion and migration ZHANG Li-jun, HONG Li, CHEN Ning, SHEN Bing-ling, DENG Yan-qiu, QUAN Wei, WANG Bei-bei, ZHANG Li-jun. Department of Pathophysiology, Basic Medical College, Tianjin Medical University, Tianjin 300070, China
Corresponding author:Zhang Li-jun, E-mail: lijunwz@
【Abstract】 Objective To observe the effect of Chlamydia pneumoniae (C.pn) infection on human epidermoid carcinoma-2(HEp-2) cell adhesion and migration, to further clarify the role and mechanism of C.pn infection in tumor metastasis. Methods HEp-2 cells were infected with C.pn after the culture and propagation of C.pn. Cytopathic effect was observed with a microscope. Morphological characteristics of C.pn inclusions in HEp-2 cells were examined under fluorescence microscope by acridine orange staining. The ultrastructural changes of C.pn inclusions in HEp-2 cells were investigated by transmission electron microscope (TEM). Cell adhesion assay was performed to investigate the effect of C.pn infection on the adhesion of HEp-2 cells to collagenⅠ. The wound-healing assay and Transwell assay was performed to explore the effect of C.pn infection on HEp-2 cell migration. Results At 72 h post-infection, C.pn infected-HEp-2 cells were swollen an
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