应用sirna术沉默twist基因表达对鼻咽癌细胞株cne-2致瘤性的影响.pdf

应用siRNA技术沉默TWIST基因 表达对鼻咽癌细胞株CNE．2致瘤性的影响 中文摘要 【目的】 ～ist属于碱性螺旋一环一螺旋(bHLH)蛋白家族，是一个保守的转录因子， 在不同的种属中其DNA结合区域序列高度保守，都能结合一种E-box的DNA序 列：CA】呵NTG。新近研究表明Twist具有癌基因的特性，多项研究结果证实，Twist 过表达在肿瘤的发生发展中发挥重要作用。Twist在多种人类恶性肿瘤中都有高 表达，同时也参与了某些上皮源性的肿瘤细胞的EMT过程，促进其侵袭转移。 其对人鼻咽癌细胞株CNE．2的迁移、侵袭和增殖等生物学活性的影响。 【方法】 在Genbank中查找出Twist基因的cDNA序列(NM000474)，根据Ambion 公司提供的siRNA Finder设计软件，按照RNAi的设计原则，设 Target 根据Twist—siRNA．1另行设计一个随机序列阴性对照，命名为 siRNA序列分别插入到瞬时表达的pGcIlesil．1质粒中，构建四种重组质粒， DNA测序检测重组质粒是否构建成功。用脂质体法将重组质粒分别转染入人鼻 咽癌细胞株CNE．2中，48h后