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靶向ATP6L的RNA干扰对肿瘤化疗的增敏作用 摘 要 第一部分靶向ATP6L的RNA干扰对肿瘤化疗的增敏作用 弱碱性化疗药物过多地分布在酸性细胞器如溶酶体中是造成肿瘤多 药耐药的重要原因之一。如果溶酶体的酸性强，弱碱性化疗药物在其中 将被质子化，而不能穿透溶酶体的膜，导致积聚在其中，最后药物通过 分泌作用被排出细胞。这个理论解释了药物的分布可以受细胞内pH如 的RNA干扰抑制质子泵的功能，达到增敏弱碱性化疗药物在耐药的乳腺 癌细胞及肝癌细胞中的作用。 第一章抑制质子泵的功能增敏化疗药物对乳腺癌的作用 方法：预先用不影响细胞生长的50nM质子泵的特异抑制剂 bafilomycin blot筛选有效干扰片段。用 MCF一7／ADR细胞，用qRT-PCR及Westem 细胞仪检测ATP6L表达下调后的溶酶体酸度；用共聚焦显微镜观察Dox 于细胞中的分布。ATP6L表达下调联用肿瘤化疗药物，用台盼兰拒染的 检测细胞的凋亡率。ATP6L表达下调联用Dox，用PI染细胞核，检测细 胞周期；通过酶标仪测定caspase．3／7水解其底物产生的生