喉癌细胞系肿瘤群细胞的研究.pdf

复旦大学博士论文 中文摘要 喉癌细胞系中肿瘤侧群细胞的研究 第一部分人喉癌细胞系Hep一2和AMC-HN一8中侧群细胞的检测 和分选 目的探讨人喉癌细胞系中是否存在肿瘤侧群细胞及建立可靠的喉癌细胞系侧群 细胞(SP细胞)检测及分选的操作规程。 Hoechst33342， 5¨g／mL 方法以人喉癌细胞系Hep一2和AMC—HN一8为研究对象， 150 lJlnol／L维拉帕米，ll上g／mL碘化丙啶，应用流式细胞技术检测细胞系中SP细胞 的比例并对Hep一2中SP细胞进行分选并检测其纯度。以含血清培养基培养sP及 FIOrl—SP细胞及细胞爬片，观察细胞活性及培养后细胞形态。 拉帕米处理后比例分别降为0％及0．3±O．1％。流式细胞术分选Hep一2细胞SP的纯度 可达99．2±0．2％，non—SP细胞的纯度达98．5±0．5％；在含血清培养基中SP及 non-SP细胞均贴壁生长，死