从随机突变到精确编辑：果蝇基因组编辑技术的发展及其演化.pdfVIP

从随机突变到精确编辑：果蝇基因组编辑技术的 发展及演化 1 1 2 1,2 1 1,3 1 苏方 ，黄宗靓 ，郭雅文 ，焦仁杰 ，李孜 ，陈建明 ，刘继勇 1.广州医科大学广州霍夫曼免疫研究所, 广州 511436； 2.中国科学院生物物理研究所脑与认知科学国家重点实验室，北京 100101； 3.国家海洋局第三海洋研究所，厦门 361005 摘要：黑腹果蝇 （Drosophila melanogaster ）是研究生命科学的重要模式动物，基因组编辑技术的发展有助 于人们更好地利用果蝇来进行遗传学、发育生物学、生物医学等领域的研究。从20 世纪开始，果蝇基因组 编辑技术经历了从随机突变到精确敲除、从单纯的基因突变体制作到多样化的基因组精确编辑的过程。甲 基磺酸乙酯 （Ethyl methanesulfonate, EMS ）化学诱变是利用正向遗传学研究基因功能的重要手段，但是无 法实现果蝇基因的精确敲除。基于同源重组建立的基因打靶技术首次实现对果蝇基因组任意位点的精确编 辑，但效率较低。CRISPR/Cas9 （Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated protein ）系统介导的果蝇基因组精确编辑相对于基因打靶技术具有简单、快速、高效的特点。本文以果蝇 基因敲除为主线，系统阐述了果蝇基因组编辑技术的演化，着重论述了基因打靶、ZFN （Zinc-finger nucleases ）、TALEN （Transcription activator-like effector nucleases ）及CRISPR/Cas9 技术的发展和应用。 关键词：果蝇；基因组编辑；ZFN ；TALEN ；CRISPR/Cas9 收稿日期：2015-07-27 ；修回日期：20 15-10-19 基金项目：国家自然科学基金青年基金项目（编号）资助[Supported by the National Natural Science Foundation of China(No.] 作者简介：苏方，硕士，专业方向：果蝇天然免疫。E-mail ：fx-su@126.com 通讯作者：刘继勇，博士，副教授，研究方向：果蝇天然免疫。E-mail ：mangriver@ 陈建明，博士，教授，研究方向：血细胞进化与适应性。E-mail ：chenjm@ 李孜，博士，教授，研究方向：果蝇天然免疫。E-mail ：lizi1002@ From random mutagenesis to precise genome editing: the development and evolution of genome editing techniques in Drosophila 1 1 2 1,2 1 1,3 Fang Su , Zongliang Huang , Yawen Guo , Renjie Jiao , Zi Li , Jianming Chen , Jiyong Liu1 1. Sino-French Hoffmann Institute ，Guangzhou Medical University, Guangzhou 511436, China ； 2. State Key Laboratory of Brain and Cognitive Science, Institute of Biophysics, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China ； 3. State Key Laboratory Breeding Base of Marine Genetic Resources, Third Institute