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半滑舌鳎雌性特异AFLP标记CseF783的克隆及在遗传性别鉴定中的应用.pdf
HEREDITAS (Beijing) 2009 1 , 31(1): 88―94
ISSN 0253-9772 研究报告
DOI: 10.3724/SP.J.1005.2009.00088
半滑舌鳎雌性特异AFLP 标记CseF783 的克隆及其在
遗传性别鉴定中的应用
1, 2 1 1 1 1 1
马洪雨 , 陈松林 , 李静 , 田永胜 , 季相山 , 张立敬
1. , , 266071;
2. , 266003
半滑舌鳎性别控制和全雌育种等研究领域中迫切需要一种能够快速鉴定鱼类个体遗传性别的有效方法。
文章采用AFLP 技术, 利用选择性引物组合(E-ACT/M-CAA)从半滑舌鳎中筛选到一条雌性特异的AFLP 标记。
对该标记进行二次PCR 扩增、琼脂糖凝胶回收、克隆、测序。分析表明, 序列全长为 791 bp, 与GenBank 中
的序列无同源性。以该雌性特异AFLP 标记DNA 序列为模板, 设计了一对特异的PCR 引物, 成功地将其转化
为SCAR(Sequence characterized amplified regions)标记, 并在 100 尾已知性别的半滑舌鳎个体(雌雄各50 尾) 中
进行验证, 结果表明, 该SCAR 标记在所有雌性个体中均扩增得到一条长度为324 bp 的DNA 条带, 而在49 尾
雄性个体中均扩增不到该DNA 条带(有1 尾雄性个体例外), 证明该SCAR 标记是雌性特异的, 并可用于半滑舌
鳎个体遗传性别鉴定。随后, 利用该SCAR 标记检测了3 日龄半滑舌鳎幼苗, 结果表明, 雌性个体比例为41.7% 。
半滑舌鳎; 雌性特异AFLP 标记; SCAR 标记; 遗传性别; 鉴定
Development of female-specific AFLP marker CseF783 and its
application in genetic sex identification in half-smooth tongue
sole (Cynoglossus semilaevis)
1, 2 1 1 1 1
MA Hong-Yu , CHEN Song-Lin , LI Jing , TIAN Yong-Sheng , JI Xiang-Shan ,
ZHANG Li-Jing1
1. Key Laboratory for Sustainable Utilization of Marine Fisheries Resources, Ministry of Agriculture, Yellow Sea Fisheries Research Insti-
tute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Qingdao 266071, China;
2. College of Marine Life Sciences, Ocean University of China, Qingdao 266003, China
Abstract: Molecular sex identification is important in studying sex control, sex determination, and all-female bree
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