富自体cgf纤蛋白膜对人牙龈成纤维细胞黏附及增殖的影响.pdf

目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………4 研究论文 富自体CGF纤维蛋白膜对人牙龈成纤维细胞黏附及增殖的影 响 前言……………………………………………………………………8日IJ吾……………………………………………………………………8 材料与方法……………………………………………………………9 结果………………………………………………………1多日7f≮………………………………………………………4 附图……………………………………………………………16 附表…………………………………………………………29 0 讨{仑………………………………………………………………3 结论………………………………………………………………33 参考文献……………………………………………………………34 综述 富自体生长因子纤维蛋白生物材料性能及其临床应用…………．．36 致谢……………………………………………………………………46 个人简历…………………………………………………………47 中文摘要 富自体CGF纤维蛋白膜对人牙龈成纤维细胞黏附及增殖的影响 摘 要 目的： 富自体浓缩生长因子(Concentrated 为新一代的血液提取物，为白体血经不间断差速离心制备而成的富含多种 高浓度生长因子的纤维蛋白，能够促进骨组织及软组织的再生和修复。本 研究旨在采用扫描电镜及HE染色，观察体外培养人牙龈成纤维细胞在 CGF膜表面的黏附及增殖，为CGF应用于牙周组织重建及其进一步临床 应用提供理论依据。 方法： 1人牙龈成纤维细胞的培养及鉴定 切取河北医科大学口腔医院口腔颌面外科门诊阻生牙拔除患者正常 牙龈组织，患者年龄18—25岁。组织块培养法原代培养，培养液选用含20％ 消化传代。取第2代生长状态良好的人牙龈成纤维细胞，采用鼠抗人波形 蛋白(Vimentin)、角蛋白抗体(cytokeratin)进行鉴定。 2实验分组及材料准备 实验分三组：CGF膜组、Bio．gide膜组及空白组 ml CGF膜制备：9Vacuette真空采血管采取患者静脉血，立即置入 上层血清，自中间层及底层交界处剪开，压膜模具将留取的中段CGF纤 维蛋白层凝胶压制成膜。修剪CGF膜至5x5mm大小，置于无菌生理盐 水中备用。 mm大小，置于无菌生理盐水备用。 Bio—gide膜修剪为5x5 3人牙龈成纤维细胞接种培养 取生长状态良好的第3代人牙龈成纤维细胞，制备成5x104／ml单细 的饱和湿度培养箱中培养，每2天换液一次。 中文摘要 4组织学观察 尔马林固定，常规石蜡包埋切片，HE染色，组织学观察。 5扫描电镜观察 electron 二醛固定，脱水，临界点干燥，喷金镀膜，扫描电子显微镜(scanning microscopy,SEM)观察。 6人牙龈成纤维细胞增殖活性MTT检测 nrn处测定各组细 分别于接种培养2天、5天，酶联免疫标记仪上490 胞吸光度OD值。每组设8个平行试样，计算各组吸光度均值(以x+s表 示)。 7统计学分析 应用SPSS13．0软件进行统计学分析，应用单因素方差分析比较三组 吸光度值，P0．05有统计学意义。 结果： 1人牙龈成纤维细胞的培养及鉴定 原代培养6天，倒置显微镜下观察：可见细胞自组织块周边生长，细 胞为长梭形，胞质向外伸出2～3个突起，胞体丰满，胞浆均匀，胞核圆形 或卵圆形，核仁大。12．14天后细胞