大型溞毒性实验标准.docVIP

采用生长面积法 ( 国家环保局, 2002) 计算96h EC50 , 计算公式如下: A =( N1 - N0) /2 ×t1 +( N1 + N2 - 2N0) /2 × ( t2 - t1) + … +( Nn- 1 + Nn - 2N0) /2 × ( tn - tn- 1) (1) 其中: A: 生长曲线以下面积; tn : 实验开始后第 n 次计数时间; N0 : 初始细胞密度; Nn : tn 时刻细胞密度. 生长抑制率( IA) 通过以下公式计算: IA =( Ac - At) /Ac ( 2) IA: 受试组与对照组相比细胞生长抑制率; Ac :对照组生长曲线以下面积; At : 受试组浓度生长曲线以下面积. 以 IA 为纵坐标, 浓度对数为横坐标作图, IA =50%所对应的浓度即为 EC50 值 相对抑制率 = (1 - NΠ N0 ) ×100 % ,其中 N 为试验组的藻密度; N0 为对照组的藻密度 土壤提取液)配置方法取花园土未施过肥0。5kg置于烧杯或三角瓶中，加入蒸馏水1000毫升，瓶口用透气塞封口，在水浴中沸水加热2小时，冷却数小时，在无菌条件下过滤，取上清液，将灭菌蒸馏水加入上清液至总体积1000毫升。土壤提取液保存在4oC备用。3.5 0 1 0 0.35 5 0.10 5 所以 正式试验的浓度范围为0.35％～1％。 C2 正式试验 C2.1 试验结果 24h的试验结果如表C2。 表C2 浓 度 24h活动的 大型蚤个数 不活动大型蚤 百分比 概率值 百分浓度 浓度对数值 0 20 16 40 67 80 93 400 4.75 5.43 5.84 6.47 0 0.35 0.46 0.60 0.77 1.0 —1 —0.45 —0.33 —0.22 —0.11 0 30 25 18 10 6 2 .2 计算24h－EC50 采用概率单位图解法 (见图C1)，24h－EC50是0.55％，对排放废水，这可表示为，24h—EC50＝0.55％或5.5mg／L。对储备液浓度为1000mg／L的化学物质，此结果可表示为： 24h—EC50 ＝0.55×1000＝5.5mg／L 概率单位图解法的计算程序如下： a .将浓度换算成浓度对数值，作为横坐标；不活动蚤百分数换成概率值作为纵坐标，在算术坐标纸上绘图。(若用对数－概率纸可不必进行上述换算，直接作图)，由于概率单位尺度达不到0和100，作图时，若是需要这祥的数值，可以使用箭头表示这些点的真正位置。 b .顺着各点的分布趋势，用直尺作出一条最接近各点的直线。作直线时应多照顾靠近概率单位为“5”处的各点。 c .从纵抽概率单位为“5”处，引一水平线与直线相交，再从交点作垂线与横轴相交，即可读出EC50的对数值，此值的反对数即是用目测法求得的EC50值LC50的计算方法相同。 C2 .3 计算机计算EC50(或LC50)及95％置信限 程序采用 BASIC语言，将寇式修正法公式输入PB－700型便携式计算机或其他类型计算机进行操作。 C2.3.1 寇式修正法公式： 1gLD50＝Xk-d(∑Pi－0.5)………………………………………………(C1) 式中：Xk——最大对数剂量； d——相邻两组对数量之差数； Pi——各组死亡率； i——组号。