以胶原海绵为支的组织工程骨实验研究.pdfVIP

摘要 由于肿瘤、炎症、外伤、先天畸形而引起的骨缺损是临床上常 见的疾病之一。现代医学的修复方法由于种种原因而不能完全满足 临床需要，组织工程学的发展为骨缺损的修复提供了新的途径。骨 组织工程由种子细胞，支架材料 细胞外基质EcM ，生长因子三个 关键因素组成。本实验以兔骨髓基质细胞 MSCs 作为种子细胞，以 胶原海绵为支架进行组织工程骨的系列研究，为将以胶原海绵为支 架构建的组织工程骨应用于临床提供理论依据。 实验一骨髓基质成骨细胞的体外培养方法与鉴定 目的：探索兔骨髓基质成骨细胞的体外培养方法，观察MSCs 向成骨细胞分化的能力。 中，置于37℃、体积分数为5％C02的培养箱中培养，传代后细胞改用 养基培养，用相差显微镜观察细胞的生长、增殖情况，并行细胞碱 性磷酸酶 ALP 染色，I型胶原检测，矿化结节四环素荧光标记 及茜素红染色。 结果：兔MSCs经培养12d后长满培养瓶底的80％，可以进行传 代培养，传代培养的细胞5d后长满瓶底的80％。细胞在条件培养基 中培养2W后出现重叠生长，形成多层结构并出现矿化结节。细胞 ALP染色，矿化结节四环素荧光标记及茜素红染色，I型胶原检测 均呈阳性。 结论：兔MSCs经体外诱导培养能分化为成骨细胞，可作为骨组 织工程的种子细胞。 实验二以胶原海绵为支架兔骨髓基质成骨细胞体外复合培养的 实验研究 目的：探索胶原海绵作为组织工程骨支架材料