表皮生长因子受在可溶性锌化合物致大鼠急性呼吸道炎症中的作用.pdf

摘要 摘要 factor 表皮生长因子受体(Epidermalgrowth 可通过直接和间接两条途径被激活。活化的EGFR可通过下游信号导通路激活 基因转录因子，进而启动细胞核内有关基因的转录、调节蛋白合成、细胞分裂、 增殖和分化和炎症性反应等。 锌也普遍存在于空气微细颗粒污染物中。锌在颗粒物所含多种金属中所占 比例最高。当前的主导观点认为空气微细颗粒物的呼吸道毒性与其化学成分， 尤其与某些可溶性金属离子相关。体内研究发现，吸入含锌颗粒物或者气管滴 注锌盐溶液均能引起呼吸道炎症。体外研究显示，外源锌离子可激活细胞内多 个信号传导通路，如表皮生长因子受体(EGFR)等。EGFR磷酸化启动了呼吸 道上皮细胞信号通路，在组织修复及正常的细胞的动态平衡过程中起到重要作 用。但是EGFR在锌离子致呼吸道损伤过程中的作用还不清楚。 研究目的 探讨锌离子对大鼠呼吸道EGFR表达及活化的影响以及EGFR在锌离子诱 导呼吸道炎症过程的作用。 材料与方法 1．复制动物炎症模型。清洁级雄性Wistar大鼠30只采用随机分为6组，每组5 h、8h、 只，支气管灌注法分别给予PBS和硫酸锌溶液各3组，分别于灌注后4 24 h处死。 2．EGFR信号传导通路阻断实验。清洁级雄性Wistar大鼠20只随机分为4组， 处理的2组大鼠分别灌注PBS或硫酸锌溶液，于灌注后8h处死。 3．观察指标。收集支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolarfluid．BALF)，使 lavage 用ELISA试剂盒检测IL．8和LDH含量；考马斯亮蓝法检测总蛋白渗出情况； blot 计数渗出炎症细胞；肺组织做病理切片观察炎症细胞浸润情况。Western 检测EGFR表达及Tyrl068活化情况。 摘要 计方差分析，比较不同灌注液及时间对大鼠急性呼吸道炎症的影响，筛选最佳 时间；应用2×2析因设计方差分析，比较预灌注液和灌注液的主效应及其交 互作用。检验水准a=O．05。 结果 1．锌离子能引起大鼠呼吸道炎症。灌注硫酸锌8h后BALF白细胞计数含量为 3．44X 8 109／L；灌注PBSh后BALF白细胞计数为1．89×109几。不同灌注液作 h、8h 用后大鼠BALF白细胞计数旷=t2．149，P0．01)不同。灌注硫酸锌4 和24h后白细胞计数分别为2．01×109／L、3．44X109／L和1．03×109／L。不同时 间点白细胞计数(，=29．569，PO．01)也不同。 2．PDl53035能够抑制锌离子引起的呼吸道炎症。不同预灌注液作用后大鼠白细 磷酸化(239．676)较DMSO组明显减少(436．320和428．360)。 结论 硫酸锌溶液能够引起大鼠呼吸道急性炎症；硫酸锌可致大鼠呼吸道细胞内 急性炎症程度。 关键词表皮生长因子受体锌离子 呼吸道炎症PDl53035 ABSTRACT ABSTRACT factor isamemberoftheerbB／HER of Epidermalgrowth receptor family a e-er3BJ with kirtles，and tyrosine proto—oncog