专题DNA重组技术的基本工具课件.pptVIP

(1)DNA连接酶的作用不是连接互补的碱基之间的氢键，而是脱氧核糖和磷酸间的磷酸二酯键。 (2)限制酶切割一次，会产生2个黏性末端或平末端，水解2个磷酸二酯键。 (3)限制酶的作用并非只是切取目的基因，还用于切割运载体。 [例3]　下面是四种不同质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示一种限制性核酸内切酶的酶切位点。若要得到一个能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组DNA的细胞，应选用的质粒是 (　　) [思路点拨] [精讲精析]　A项破坏了复制必需的序列，不能复制。B项氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因都完好，在四环素培养基上和氨苄青霉素培养基上都能生长。C项氨苄青霉素抗性基因被破坏，四环素抗性基因完好，能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长。D项氨苄青霉素抗性基因完好，四环素抗性基因被破坏。 [答案]　C 对限制酶和载体切割位点的说明 (1)若用于切割载体的限制酶有多个切点，则切割后载体可能丢失含有复制起始点的片段，重组DNA分子进入受体细胞后便不能进行自主复制。 (2)切点所处位置必须在载体本身需