第一篇 蛋白质化学-1课件.ppt

茶学与生物系 蛋白质是生物体重要组成分成 　　protein 源于προτο（第一重要的） 分布广：所有的器管、组织都含有蛋白质；细胞的各个部位都含有蛋白质； 种类多：蛋白质是细胞内最丰富的有机分子，占人体干重的45%；有些组织含量更高，例如脾、肺、横纹肌高达80%。 主要内容 第一节 蛋白质概论 第二节 氨基酸 第三节 蛋白质分子结构 第四节 蛋白质的结构与功能 第五节 蛋白质的理化性质与分离纯化 掌握：氨基酸结构特点、理化性质；肽键的结构与特点；蛋白质分子结构；蛋白质结构与功能的关系；蛋白质变性与复性； 熟悉：蛋白质的元素组成及生物功能；蛋白研究的常规方法； 了解：蛋白质的水解、蛋白质的分类。 是一切生物体中普遍存在的，由天然氨基酸通过肽键连接而成的生物大分子；其种类繁多，各具有一定的相对分子质量，复杂的分子结构和特定的生物功能；是表达生物遗传性状的一类主要物质。 3.蛋白质水解 蛋白质和多肽的肽键可被催化水解 酸/碱能将蛋白完全水解 酶水解一般是部分水解 ◆ 酸水解 6mol/L HCl或4mol/L H2SO4回流煮沸20h左右。Trp破坏，羟基氨基酸（Ser，Thr）有一小部分被分解，天冬酰胺、谷胺酰胺脱酰胺基；不引起消旋。 ◆ 碱水解（ 5mol/L NaOH煮10~20h。消旋（即D-型和L-型的混合物，Trp稳定；多数氨基酸遭不同程度的破坏。 ◆ 酶水解 不产生消旋作用也不破坏氨基酸，一般水解不彻底。水解位点特异，用于一级结构分析，肽谱分析。 二、生物体内的氨基酸类别 二十种常见蛋白质氨基酸的分类、结构及三字符号 非极性R基团氨基酸 不带电荷极性R基团氨基酸 带电荷R基团氨基酸 中性脂肪族氨基酸 酸性氨基酸及酰胺 碱性氨基酸 杂环氨基酸 芳香族氨基酸 1.两性性质和等电点 甘氨酸滴定曲线 谷氨酸（A）和赖氨酸（B）滴定曲线和等电点计算 2.氨基酸光学活性和光谱性质 互不能叠合的镜像关系的旋光异构体，称为对映体，除了具有程度相等而方向相反的旋光性和不同的生物活性外，其他物理化学性质完全相同。 2.氨基酸光学活性和光谱性质 （1）与亚硝酸反应 （3）烃基化反应——Sanger反应 （3）烃基化反应——Edman反应 4.α-羧基参与的反应 （1）含-OH基的氨基酸的酯化反应 （2）Pauly反应——（Tyr和His):与重氮化合物对氨基苯磺酸反应生成橘黄色(棕红色)化合物; （3）Cys的－SH反应：①与重金属反应; ②与巯基保护基反应，碘乙酰胺，氯化苄等; ③与二硫硝基苯甲酸(DTNB)反应，释放一分子的硫硝基苯甲酸，其在412nm处有吸光值；④在蛋白质中生成胱氨酸（还原剂：巯基乙醇、巯基乙酸，氧化剂：过甲酸）。 小 结 1.蛋白质定义、分类、元素组成、生物功能及重要性质； 2.蛋白质构件分子——氨基酸； （1）基本结构； （2）分类； （3）理化性质 课堂练习 课堂练习 苯丙氨酸 （Phe,F） 酪氨酸 （Tyr,Y） 色氨酸 （Trg,W） pH = pI 净电荷=0 pH pI 净电荷为正 pH pI 净电荷为负 CH R COOH NH3+ CH R COO NH2 CH R COO NH3+ + H+ + OH- + H+ + OH- (pK′1) (pK′2) 当氨基酸溶液在某一定pH值时，使某特定氨基酸分子上所带正负电荷相等，成为两性离子，在电场中既不向阳极也不向阴极移动，此时溶液的pH值即为该氨基酸的等电点(isoelctric point)。 三、氨基酸的性质 20种氨基酸的pI pI 氨基酸 pI 氨基酸 pI 氨基酸 pI 氨基酸 2.77 Asp 6.53 Thr 6.30 Pro 6.02 Ala 7.59 His 5.65 Gln 5.68 Ser 5.74 Met 10.76 Arg 5.41 Asn 5.97 Gly 6.02 Ile 9.74 Lys 5.66 Tyr 5.89 Trp 5.98 Leu 3.22 Glu 5.02 Cys 5.48 Phe 5.97 Val 甘氨酸盐酸盐（A+） 等电点甘氨酸（A?） 甘氨酸钠（A-） 一氨基一羧基AA的等电点计算： pI= 2 pK′1+pK′2 酸性氨基酸，以Asp为例： 碱性氨基酸，以Lys为例： 一氨基二羧基AA的等电点计算： pI= 2 pK′1+pK′2 二氨基一羧基AA的等电点计算： pI= 2 pK′2+pK′3 B A pK1 pK2 pI pI pK3 pK3 pK2 pK1 加入的OH-mL