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第七章 吸光光度法 §7.1 吸光光度法基本原理 §7.2 光度计及其基本部件 §7.3 显色反应与条件的选择 §7.4 吸光度测量条件的选择 §7.5 吸光光度法的应用 §7.6 紫外吸收光谱法简介 九寨沟的水为啥出名？不同的颜色？ 吸光光度法概述 特点： 概念： 光是一种电磁波，根据波长或频率排列。 波长范围 ＜10-1nm 10-1 ～10nm 10～400nm 400～750nm 0.75～1000μm 0.1～100cm 1～1000cm 光谱区域 γ射线 X射线 紫外光 可见光 红外光 微波 无线电 表1 物质颜色与吸收光颜色的互补关系 7.1.1 物质对光的选择性吸收 电子能级间跃迁 吸收曲线与最大吸收波长 由吸收曲线： 7.1.2 光的吸收基本定律 ──朗伯-比耳（Larnbert-Beer）定律 朗伯—比耳定律数学表达式 摩尔吸收系数ε 摩尔吸收系数ε 7.1.3 偏离比耳定律的原因 物理性因素： 非单色光作为入射光引起的偏离： 讨论： 讨论： (2) 化学性因素 §7.2 光度计及其基本部件 7.2.1 基本组成 722型分光光度计 7.2.2 主要部件 2. 单色器 3. 样品室 4. 检测系统 将光信号转化成电信号--光电管，光电倍增管，光伏电池。 5. 读出系统 百分透光率T%，吸光度A 多通道仪器（Multichannel Instruments） 光电二极管阵列(通常具有316个硅二极管) photodiode arrays (PDAs) 同时测量200～820nm范围内的整个光谱, 比单个检测器快316倍,信噪比增加 316 1/2 倍. §7.3 显色反应与条件的选择 3.氧化还原显色反应 7.3.2 显色剂 7.3.3 显色反应条件的选择 5.溶剂 7. 干扰的消除 7.3.4 三元配合物在光度分析中的应用特性简介 §7.4 吸光度测量条件的选择 7.4.2 参比溶液的选择 7.4.3 吸光度读数范围的选择 最佳读数范围与最佳值: §7.5 吸光光度法的应用 7.5.2一元弱酸离解常数的测定 7.5.3 双波长分光光度法 例1 邻二氮菲光度法测铁 : ?(Fe)=1.0mg/L, b=2cm , A=0.38,计算? 解： c(Fe)=1.0 mg/L=1.0×10-3/55.85 =1.8×10-5mol/L 例题2：相对摩尔质量为180的某吸光物质的ε= 6.0*103，稀释10倍后在1.0cm吸收池中测得吸光度为0.30，计算每升原溶液中含有这种吸光物质多少毫克？ 解：由题意稀释后的浓度为 c=A/(εb)=0.30/(6.0*103*1.0)=5.0*10-5mol/L 原溶液的浓度c原=10c=10*5.0*10-5=5.0*10-4 mol/L 则每升原溶液中含有这种吸光物质m= c原*M=5.0*10-4*180=0.09 mg/L §7.6 紫外吸收光谱法简介 1.　σ→σ＊跃迁 3. π→π＊ 跃迁 7.6.2影响紫外吸收光谱的因素 红移与蓝移 7.6.3 紫外吸收光谱法的应用 思考题 思考题 思考题 1. 光源 在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。 可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500 nm。 紫外区：氢、氘灯。发射185～400 nm的连续光谱。 将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任意波长单色光的光学系统。 单色器一般由入射狭缝、准光器（透镜或凹面反射镜使入射光成平行光）、色散元件、聚焦元件和出射狭缝等几部分组成。其核心部分是色散元件，起分光的作用。 色散元件：棱镜或光栅，使不同波长的光以不同角度传播。 构成：狭缝、准直镜、棱镜或光栅、会聚透镜。 入射 狭缝 准直镜 物镜 棱镜 焦面 出射 狭缝 f 入射狭缝 准直镜 光栅 物镜 出射狭缝 f 其中最主要的分光元件为棱镜和光栅 吸收池: 比色皿，玻璃（可见） 石英（可见、紫外） 为减少光的损失，吸收池的光学面必须完全垂直于光束方向。 1个光电子可产生106～107个电子 光电倍增管 7.2