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一、历史 1906 Tswett 研究植物色素分离，提出色谱法的概 念； 1941 Martin和Synge提出液-液色谱理论； 1952 James和Martin发展了气相色谱； 1956 Van Deemter提出速率理论； 1967 Kirkland等研制高效液相色谱法； 80年代以后 出现毛细管电泳和毛细管电动色谱等一系列新的色谱分析方法。 色谱流出曲线 根据色谱峰的个数，可以判断样品中所含组分的最少个数； 根据色谱峰的保留值，可以进行定性分析； 根据色谱峰的面积或峰高，可以进行定量分析； 根据色谱峰的保留值及其区域宽度，可以评价色谱柱分离效能； 根据色谱峰两峰间的距离，可以评价固定相（或流动相）选择是否合适。 分配系数 K（热力学性质） K只与固定相和被分离物质的性质有关 K值的差别是分离的先决条件， 差别越大，分离的可能性越大 K值大的组分后出峰 塔板理论的四个假设 1、在柱内一小段长度H内，组分可以在两相间迅速达到平衡。这一小段柱长称为理论塔板高度H。 2、流动相（如载气）进入色谱柱不是连续进行的，而是脉动式，每次进气为一个塔板体积（ΔVm）。 3、所有组分开始时存在于第0号塔板上，而且试样沿轴（纵）向扩散可忽略。 4、分配系数在所有塔板上是常数，与组分在某一塔板上的量无关。 结论：细而均匀的颗粒，填充的越均匀，A↓，H↓，柱效n↑ 表现在涡流扩散所引起的色谱峰变宽现象减轻，色谱峰较窄。 高效液相色谱 HPLC和超高效液相色谱 UPLC 提高分离度的途径 1、n 2、增大容量因子k：R 随 k 增大而增大，但是分析时间也随之延长 ? 为了增大k值，可采用的方法： （1）GC: 增加固定液的用量，适当降低柱温 （2）LC: 适当采用极性较小一些的流动相 3、增大选择性因子r值: 由于r的微小变化，都对R有很大的影响，增大r值是改 善分离度的最有力的手段 ? 为了增大r值，可采用的方法： （1）GC: 适当降低柱温 （2）LC: 通过控制固定相和流动相的性质来调整 ? ? 存在的问题： r的变化不像n和k有规律可循 3.柱温的选择 3.柱温的选择 (p226-227) 选择柱温要兼顾几方面的因素。一般原则是：在使最难分离的组分有尽可能好的分离前提下，采取适当低的柱温，但以保留时间适宜，峰形不拖尾为度。具体操作条件的选择应根据实际情况而定。 另外，柱温的选择还应考虑固定液的使用温度，柱温不能高于固定液的最高使用温度，否则固定液挥发流失，对分离不利。 控制在固定液的最高使用温度（超过该温度固定液易流失）和最低使用温度范围之内。 3.柱温的选择 (p226-227) 对于宽沸程的多组分混合物，可采用程序升温法，即在分析过程中按一定速度提高柱温，在程序开始时，柱温较低，低沸点的组分得到分离，中等沸点的组分移动很慢，高沸点的组分还停留于柱口附近；随着温度上升，组分由低沸点到高沸点依次分离出来。 7.4.3毛细管柱 固定液的分类 几种常见的固定液的相对极性 7.3.3.1检测器的性能指标 （1）灵敏度（Sensitivity） S:指样品量变化引起信号变化的程度，程度越大灵敏度越高。 噪声(基线): 无样品通过检测器时基线的起伏，决定着能被检测到的浓度。 （3）线性范围（Linear range） 指检测器信号与样品浓度（或量）之间成正比关系的范围。 基线漂移：基线向一个方向有规律移动。 产生原因：柱温或载气缓慢变化，电子元器件性质变坏，固定液流失等等 《国内分析仪器的项目规划》的调研，考察了部分地区质检部门县级检验机构和基层口岸实验室的能力、装备和建设情况。 在这些检测机构中，装备主要是分析仪器，约占80%~90%。主要仪器为气相色谱仪、液相色谱仪、气相色谱—质谱联用仪、液相色谱—质谱联用仪、原子荧光光谱分析仪、原子吸收光谱仪、紫外分光光度计等产品。 通过调研，我们可以发现，这些检测机构装备的都是国际上的知名品牌，仅有原子荧光光谱仪是国产的。 进口品牌：沃特世（Waters）、安捷伦（Agilent）、日本岛津（Shimadzu）、美国科学系统（SSI）、戴安（Dionex）、 PE（PerkinElmer）、瓦里安（Varian，被安捷伦收购）、热电（Thermo）、日立（Hitachi、天美代理）、日本分光（Jasco、华洋科仪代理）、德国诺尔（Knauer）、贝克曼（Bekman） 国产品牌（含国内组装）：北分瑞利、莱伯泰科（北京）、北京创新通恒、北京温分、北京东西电子、苏州岛津、上海天美、上海伍丰、上海通微、南京科捷、浙江福立等。 休息 7.5 定性与定量分析 5、其它检测器 （1）GC-MS （2）GC-FTIR