实验DNA的粗提取及检验解决方案.ppt

二苯胺试剂 A液:1.5克二苯胺(C12H11N)溶于100ml冰醋酸(乙酸,C2H4O2)中,再加1.5ml浓硫酸,用棕色瓶保存(光下分解)。如冰醋酸呈结晶状态,则需加温后待其熔化,再使用。 B液:体积分数为0.2%的乙醛溶液(C2H4O)。 将0.1mlB液加入10mlA液中,制成二苯胺试剂,现配现用。 * 问题1:构成生物体的遗传物质是什么? 问题2:如何证明它们是遗传物质? 问题3:怎样才能将细胞内的这些物质分离出来? 第二讲(实验) DNA的粗提取和鉴定 生物必修2 染色体成分 蛋白质 RNA(少量) DNA 提取 的基本思路: 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。 DNA的粗提取与鉴定 原理、方法和目的 鉴定DNA 加入二苯胺,并沸水浴 DNA可被二苯胺染成蓝色 DNA析出,除去溶于酒精的蛋白质 加入冷却酒精(95%) DNA不溶于酒精溶液 嫩肉粉中含木瓜蛋白酶,水解蛋白质(酶的专一性) 加入嫩肉粉 DNA不被蛋白酶所水解 ①NaCl溶液为2 mol/L时,DNA溶解,而部分蛋白质发生盐析生成沉淀,通过过滤可除去部分蛋白质及不溶于NaCl溶液的杂质 ②当NaCl溶液稀释至0.14 mol/L时,DNA析出,过滤可除去溶于NaCl溶液的部分蛋白质和其他杂质 溶于NaCl溶液中并稀释 DNA

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