脓汁和粪便标本中病原菌的检测1详解.pptVIP

医学微生物学实验 Medical Microbiology Practicum 张三李四 020-62-789123 0757-299-85246 南方医科大学公卫学院微生物学系 微生物学实验室规则Lab Safety Regulation 进入实验室必须穿白大衣，戴帽子。 书本、文具放在抽屉里。 实验室内不准吃东西、喝饮料，不准把任何东西放入嘴中，也不要用手抚摸头脸等部位。 凡是废弃的细菌培养物、带菌材料，应放在指定地点等待灭菌处理，不得随便乱放或用水冲洗。 一旦发生意外，造成污染，应立即报告老师进行处理。 离开实验室前,必须洗手。怀疑污染应及时用1‰新洁而灭泡手。 每次实验后，实验台用消毒液擦拭，地板先用湿的拖布拖地以后再扫地，实验室用紫外线灯照射1小时。 实验分组（45人） 俩俩相对4人为一个小组,组号编在电源插座上。 每组按从前到后,从左到右的顺序，分别编号为甲乙丙丁。 实验分组（40人） 俩俩相对4人为一个小组,组号编在电源插座上。 每组按从前到后,从左到右的顺序，分别编号为甲、乙、丙、丁。 实验分组（36人） 俩俩相对4人为一个小组,组号编在电源插座上。 每组按从前到后,从左到右的顺序，分别编号为甲、乙、丙、丁。 实验分组（32人） 俩俩相对4人为一个小组,组号编在电源插座上。 每组按从前到后,从左到右的顺序，分别编号为甲、乙、丙、丁。 医学微生物学实验综合性实验一Comprehensive Experiment 1 脓汁和粪便标本中病原菌的检测（P2） Isolation and detection of pathogenic bacteria in pus and stool specimens 培养基的制备P2 消毒与灭菌P5 细菌的人工培养 无菌技术（录像） 摆斜面，倾注平板。 脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验流程(6次课12学时） 培养基的制备 Preparation of Culture Media 培养基的制备 Preparation of Culture Media 培养基的制备 Preparation of Culture Media 培养基的制备 Preparation of Culture Media 各组边台柜子内器材 各组边台抽屉内器材 培养基配制器材 培养基制备程序 干粉培养基→蒸馏水→加热溶化→分装→集中放在试管筐里→ 罩上硫酸纸、牛皮纸→ 用橡皮筋扎好 →放入讲台边的灭菌桶或灭菌筐内→送到高压蒸汽灭菌室（洗刷室）→灭菌。 ※请在 30分钟内完成。 培养基的制备 Preparation of Culture Media Preparation of Culture media Group formation: Four students each form one group Total of 10 groups (10× 4= 40) Each group will prepare the media according to the instruction given in next slide. Preparation of Culture Media 玻璃器材的洗刷 无污染器皿:洗涤剂洗刷→流水冲洗10次→晾干。 病原菌污染的器材→高压蒸汽灭菌→趁热倒出污物→洗涤剂浸泡→瓶子、试管、吸管用毛刷，平皿用纱布，洗刷干净→流水冲洗10次→晾干。 收拾器材，放回边台柜内，依次摆整齐! 收拾器材，放回抽屉内，依次摆整齐! 细菌培养基 Culture Media 用人工的方法，将多种营养物质，根据各种微生物生长繁殖的需要而合成的一种营养制品。它的主要成分是蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和水，pH7.4～7.6。 培养基制备的一般程序： ①调配→溶化→ 矫正pH →分装→灭菌→检定→保存。 ②干粉培养基→蒸馏水→加热溶化→分装→灭菌→检定 →保存。 培养基的制备原则： (1)适当的营养成分,(2)合适的酸碱度,(3)配制后必须灭菌。 培养基的灭菌 在冷空气完全排尽的情况下，蒸汽压103.43 kPa ,温度可达到121.3℃ ,维持15～30分钟，可以杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物。 基础培养基：121℃高压蒸汽灭菌15～30分钟。 含糖培养基：115℃灭菌15分钟。 鸡蛋、牛奶培养基:75～100℃30分钟，3次(1天1次)。 不耐高温的液体成分：滤菌器滤过除菌 EK型蔡氏滤器、 G5或G6玻璃滤器、0.45um或0.22um微孔滤膜。 琼脂平板 agar plate 琼脂斜面 agar slant 怎样检查培养基是否合格? ★无菌试验：将待检培养基置于35～37℃培养箱培