高三一轮复习探究酵母菌种群数量的变化(结合微生物培养技术)分析报告.ppt

* 探究：培养液中酵母菌种群数量的变化 目的要求 1、学习利用血球计数板进行微生物计数的方法 2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化 3、注意样方法的应用 4、体会影响种群数量变化的因素 1、酵母菌的呼吸方式是: 兼性厌氧(可进行有氧呼吸和无氧呼吸) 回顾思考: 2、为什么用液体培养基培养酵母菌？ 固体培养基可以吗？ 培养基 固体培养基 液体培养基 按物理性质分 用途 用途 固体培养基 1.平板，主要用于 培养出细菌菌落 2.植物组织培养得到新的植株 1.平板，主要用于培养出细菌菌落 2.植物组织培养得到新的植株 固体培养基 用途 1.主要是用于扩增细胞，使细胞 数量增多。如动物细胞培养、 研究酵母菌种群数量的变化等 2.用于得到细胞产物的时候： 在液体环境中，表达大量的产物， 再离心收集。如通过植物组织培养 技术来大量获得抗癌药物---紫杉醇 液体培养基 离体的组织、 器官或细胞 脱分化 愈伤组织 细胞 增殖 细胞代谢产 物（紫杉醇） 例如：酵母菌的种群数量在营养条件有限的情况下呈S型增长。 探究：培养液中酵母菌种群数量的变化 酵母菌的计数 （1）计数工具——血球计数板 实物图 正面图 侧面图 计数室 滴液处 血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。 计数时，常采用样方法。 酵母菌的计数 （1）计数工具——血球计数板 探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化 放大后的计数池 每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。 每个计数池分为9个大方格。 25个中格 16个小格 16个中格 25个小格 25 X 16=400小格 16 X 25=400小格 如果使用16格×25格规格的计数室, 要按对角线位,取左上,右上,左下,右下 4个中格(即100个小格)的酵母菌数. 问题1、如何取样计数呢？ 25个中格 16个中格 * * * * * * * * * 用规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数. （五点取样法） 每1ml菌液中所含的酵母菌个数 计算公式（如长和宽各为1mm） ： (1)16格×25格的血球计数板计算公式 酵母细胞数/ml= (100小格内酵母细胞个数/100)×400×稀释倍数 10-4 即(100小格内酵母细胞个数/100)× 4× 106×稀释倍数 (2)25格x16格的血球计数板计算公式: 　　酵母细胞数/ml= (80小格内酵母细胞个数/80)×400×稀释倍数 10-4 即(80小格内酵母细胞个数/80)× 4× 106×稀释倍数 计数室有长×宽：1mm×1mm, 2mm×2mm 3mm×3mm等 深度均为0.1mm。 单位换算:大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.换算为1mL为0.1/1000即1/10000mL即10-4 mL 。 计数室的规格： 1mm 1mm 1mm 每个计数室共有400小格，总容积为0.1mm3 使用方法: 将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖玻片.将稀释后的酵母菌培养液,用吸管吸取滴于盖玻片的边缘,使菌液自行渗入,多余的菌液用滤纸吸去,稍待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室底部. 如果先加入培养液，再盖上盖玻片，会怎样影响使计数结果？ 偏大 第 1 天 第 4 天 第 6 天 一个小方格内的酵母菌数量过多，难以计数，怎么办？ 酵母菌在水中会不会吸水过多而涨破？ 第 7 天 死亡 关注本实验中的几个关键点： 酵母菌的计数 利用血球计数板在显微镜下直接计数，是一种常用的微生物计数法，也叫做显微镜直接计数法。 优点：直观、快速。 适用于稀释的菌悬液（或孢子悬液），即液体培养基中菌体的计数。 此法计得的是活菌体和死菌体的总和，又称为总菌计数法。 那么如何只计数活酵母菌？ 选修1中还学过，只统计活菌数的方法--- 稀释涂布平板法 加入台盼蓝染液 使酵母菌混合均匀，减少误差 不需要。但是有对照，时间先后已形成自身对照。 需要。尽量减少误差。对每个样品计数三次,取其平均值。 如果未震荡，会怎样？ 偏大或偏小 只计相邻两边及顶角的酵母菌 稀释培养液。稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数 7. 对于压在小方格界线上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数。