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实验报告 题 目学 生 姓 名学 号指 导 教 师： 专 业 年 级： 一鸡传染性法氏囊病的检疫。 1：实验目的：了解掌握鸡法氏囊的诊断方法 2：实验器材与药品。 氯化钠、等离子水、琼脂粉、电炉、平皿、打孔器、电子称、酒精灯、微量移液器、鸡传染性法氏囊病毒琼脂扩散实验阳性血清、阴性血清、待检血清、鸡传染性法氏囊病病毒琼脂扩散实验抗原。 3：实验方法。 3.1琼脂平板配置：取8g氯化钠溶解于100毫升离子水中，加优质琼脂1g，加热将琼脂粉底融化，然后注入灭菌平皿中，待凝固后使用或存于4℃冰箱中备用。 3.2打孔：在已制备的琼脂板上，用直径4mm或3mm的打孔器如图1打孔。中心孔与外周距离3mm，打孔时切下的琼脂用针头轻轻挑出，勿损坏孔的边缘。 3.3封底：适当加热平皿底部，使琼脂与玻璃平皿贴紧，避免由于打孔时导致琼脂与平皿脱离。 3.4加样：用微量移液器在中央孔加入已知的诊断抗原，外周加入标准阳性血清，阴性血清以及待检血清，置于37℃湿盒内作用24~48小时。 4：结果判定。 抗原孔与对照阴性血清之间出现清晰的乳白色沉淀线，与阴性血清之间无沉淀线出现，抗原与待检样品之间出现清晰的乳白色沉淀线者判定为阳性，否则为阴性。 5,：实验结果。 在琼脂板中的中央孔加抗原，其后依次为：1，阳性血清、2阴性血清、3,4,5，6为待检血清。一共制备了4块平板。 1号平板：抗原孔与对照阴性血清之间出现清晰的乳白色沉淀线，与阴性血清之间无沉淀线出现，抗原与待检样品之间出现乳白色沉淀线，对照阳性血清孔与抗原孔之间出现的沉淀线末端向待检血清孔内侧偏弯。可判定为阳性。 2号平板：抗原孔与对照阴性血清之间出现不清晰的乳白色沉淀线，与阴性血清之间无沉淀线出现，抗原与待检样品之间出现不清晰的沉淀线，标准阳性血清孔与抗原孔之间的沉淀线末端向受检血清孔内侧偏弯或微弯者。虽出现沉淀线，但是阳性结果不明显，对照血清的沉淀线也不明显。为疑似。 3号平板：抗原孔与对照阴性血清之间出现清晰的乳白色沉淀线，与阴性血清之间无沉淀线出现，抗原与待检样品之间出现清晰的乳白色沉淀线，在受检血清孔与抗原孔之间有明显的 沉淀线，并与标准阳性血清沉淀线末端互相连接。为阳性。 4号平板：由于实验操作错误，各个孔之间无任何沉淀线产生。 5：小结。 在实验过程中在打孔，挑琼脂，封底和加抗原、血清各个环节都应该做到无错误操作。否则一个环节出现差错，就不会出现实验结果。我们在4号板3号板的操作过程中就出现问题，导致实验结果不明显甚至无实验结果。 在观察的过程中发现最好在适当的时间观察，最好在24~27h这段时间，否则时间过程会导致沉淀线重合，沉淀线消失。 二：鸡白痢的检疫 1:实验目的：学会掌握鸡白痢的血清学检疫方法 2：实验器材与药品。 鸡血清样品、抗原、试管、吸管、载玻片 3：实验方法。 血清平板凝集反应：用一块玻板以蜡笔按约3cm2画成若干方格，一个方格检查一只鸡的血清样品。每一方格加被检鸡血清1滴和抗原1滴，用牙签将抗原与血清充分混和。 3：结果判定。 血清平板凝集反应：观察30―60秒钟，凝集者为阳性，否则为阴性。此试验应在10℃以上室温进行。 4：实验结果： 血清平板凝集反应结果未出现凝集，为阴性。 5：小结： 实验检测出样品血液未出现鸡白痢病。在实验过程中，滴加血清和抗原时不能过量，两滴中间应该有一定间隔，然后用细棒类物品慢慢将两滴液体混合，然后对光观察结果。