紫外可见分光光度法实验技术要点分析.pptVIP

紫外-可见分光光度计 化学化工学院 荆俊杰 紫外-可见吸收光谱分析 在仪器分析中，紫外-可见分光光度法是历史悠久、应用最为广泛的一种光学分析方法。它是利用物质的分子或离子对某一波长范围光的吸收作用，对物质进行定性分析、定量分析及结构分析，所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。 一、紫外-可见吸收光谱的特点 相对于其他光谱分析方法来说，其仪器设备和操作都比较简单，费用少，分析速度较快。 灵敏度较高。其最低检出浓度可达到10-6g/ml. 有较好的选择性。 精密度和准确度较高。其相对误差可减至1%~2%。 用途广泛。在医药，化工，治金，环境保护，地质等到诸多领域。紫外-可见吸收光谱分析法已成为必不可少的测试手段之一。 二、紫外-可见吸收光谱的应用 1）定性分析 2）定量分析 3）异构体的判断 4） 纯度检查 1）定性分析 判断共轭关系及某些官能团。如在（200~400）nm之间无吸收峰，说明该未知物无共轭关系，且不会是醛、酮，很可能是一个饱和化合物。 2）定量分析 用于测定物质的浓度或含量，测定步骤与可见光分光光度计相同 。 3）异构体的判断 例如：乙酰乙酸乙酯存在酮-烯醇互变异构体。酮式没有共轭双键，在204nm处有弱吸收；烯醇式有共轭双键，在245nm处有强吸收。故可根据它们的紫外吸收光谱可判断其存在与否。 4） 纯度检查 例如，如果一化合物在紫外区没有吸收峰，而其中的杂质有较强的吸收，就可方便检出该化全物中的痕量杂质。 三、紫外吸收光谱的基本原理 光在与物质作用时，物质可对光产生不同程度的吸收。我们可以利用测量物质对某些波长的光的吸收来了解物质的特性，这就是吸收光谱法的基础。物质的结构决定了物质在吸收光时只能吸收某些特定波长的吸收，也就是说，物质对光的吸收是具有选择性的。 三、紫外吸收光谱的基本原理 通过测量物质对不同波长的吸收程度（吸光度），以波长为横坐标。吸光度为纵坐标，就可以得到该物质在测量波长范围内的吸收曲线。这种曲线体现了物质对不同波长的光的吸收能力称为吸收光谱。 四、紫外光吸收光谱的波长范围 紫外可见光谱区是在（4~800）nm的电磁波，其中（4~400）nm的电磁辐射称为紫外区，它又分为两段：（4~200）nm为远紫外区，（200~400）nm的电磁波称为近紫外区，而波长在（400~800）nm的电磁波为可见光区。因此，有机化合物测定中所谓的紫外光谱是指（200~400）nm近紫外区的吸收光谱，通常用UV表示。由于玻璃对波长300nm以下的电磁波有吸收，在300nm以下的测定中光学元件不能使用玻璃，一般以石英制品代替，在300nm以下的区域又称石英区。 四、紫外光吸收光谱的波长范围 玻璃比色皿的紫外吸收图 石英比色皿的紫外吸收图 五、紫外光谱图的表示方法 紫外光谱通常是以吸收曲线的形式表示。纵坐标为吸收强度（ε）用lgε表示，也有用吸光度（A）或透光率T表示。横坐标多用波长（λ）表示，单位为nm。当化合物的最大吸收在某波长位置时，则波长用λmax表示。 对于同一物质，浓度不同时，各波长处的吸光度值不一样。但吸收曲线相似，最大吸收波长不变。 六、电子跃迁 有机物最有用的吸收光谱是基于π-π*和n-σ*跃迁而产生的，这两类跃迁所需要的辐射能量大多处于波长大于200nm的区域。它们要求分子中含有不饱和键，这种含有不饱和键的基团称为生色团。如C=C、 C=O、苯环等 。 七、影响紫外-可见吸收光谱因素 物质的吸收光谱与测定条件有密切的关系。测定条件不同，吸收光谱的形状、吸收峰的位置、吸收强度等都有可能发生变化。 七、影响紫外-可见吸收光谱因素 温度：在室温范围内，温度对吸收光谱的影响不大。在低温时，吸收强度有所增大；在高温时，谱带变宽，谱带精细结构消失。 溶剂：由于紫外光谱的测定大多数在溶液中进行，而溶剂的不同将会使吸收带的位置及吸收曲线的形态有较大的影响。所以在测定物质的吸收光谱时，一定要注明所用的溶剂。 七、影响紫外-可见吸收光谱因素 PH值：很多化合物都具有酸性或碱性可解离基团，在不同PH值的溶液中，分子的解离形式可能发生变化。其吸收峰的形状、吸收峰的位置、吸收强度等都有可能发生变化。 仪器的狭缝宽度：狭缝宽度越大，光的单色性越差，吸收光谱的细微结构就可能