第五章细菌与噬菌体的遗传(B).pptVIP

1??噬菌体的突变型及基因重组的特点 噬菌体的遗传重组与细菌不同，与真核生物的重组十份相似，但噬菌体遗传有一些特殊现象。 （1）从单个混合感染的细菌中可得到亲本和重组噬菌体。 例如两个不同的噬菌体A+B-和A-B+同时感染一个细菌细胞，可释放出亲本噬菌体A+B-和A-B+及重组噬菌体A+B+和A-B-，但A-B-选不出来。 （2）三亲本重组体的出现 把三种突变型的噬菌体（x-y+z+、x+y-z+、x+y+z-）混合感染同一细菌，有重组型（x+y+z+、x-y-z-）出现，表明三个噬菌体中重复发生2次基因重组才能得到三亲重组体。重组可以一再发生，这与细菌不同。 由于T4 rII的生长是由条件的，所以可用选择技术，把所有的rII突变型成对杂交，计算每对突变位置间的重组频率。 4 噬菌体的互补测验 不同的rII突变型是属于同一基因或不同基因，需要互补测验来确定突变的功能关系。 互补测验：两个突变型同时感染E.coliK(λ)菌株，可以相互弥补对方的缺陷，共同在菌内繁殖，释放原来的2个突变型。也称顺反测验。 （1）顺反子的概念 顺反子是指通过顺反测验所确定的遗传单位，是DNA分子的一段序列。在一个基因内部，可以发生若干不同位点的突变，倘若在一个基因内部发生两个以上位点的突变，其顺式和反式结构的表型效应是不同的，基因内部的功能互补群称为顺反子。 （2）rII顺反测验 rII区段突变的性质： rII突变具有共同性 状，按经典遗传学理 论，rII区段为一个基 因； 本泽所用的ｒⅡ突变型可以分成A组和B组两类，只有当一个A组的一个B组的突变体混合感染K12(λ)时，才发生溶菌现象，即互补现象。而两个A组突变体或两个B组突变体则没有溶菌现象，即不发生互补作用。 对顺反子现象的解释： 同一顺反子的两个突变（反式结构）：两个突变位点分居于A顺反子的两个等位基因上，使两个相同的等位基因都失去功能（不能形成有功能的蛋白）。 其它三种情况突变位点所处的位置，两个相同的等位基因都能产生互补作用。 基因内部这些不同位点之间还可以发生交换和重组。所以，一个基因不是一个突变单位，也不是一个重组单位。本泽分别把它们称为突变子（muton）和重组子（recon）。显然，一个突变子或重组子可小到一个核苷酸对。 基因内部是可分的，包含多个突变单位和重组单位。 早期的基因概念是把基因作为决定性状的最小单位、突变的最小单位和重组的最小单位，即“三位一体”。 基因的顺反子概念冲破了传统的“功能、交换、突变”三位一体的基因概念，纠正了长期以来认为基因是不能再分的最小单位的错误看法，使人们对基因的认识有了显著的提高。 （3）缺失作图 点突变和缺失突变的区别： 1、点突变是单个位点的突变，缺失突变是多个位点的突变； 2、点突变可回复，而缺失突变不可； 3、点突变之间可发生重组，缺失突变同另一个基因组在这个缺失区的点突变 间不可重组，即无法通过重组而恢复野生型核苷酸顺序。 利用一系列缺失重叠突变型，使测定工作简单化，大大减轻了绘制连锁图的工作。 该方法只需观察能否重组，无须对重组子个数进行统计，使绘制连锁图的准确性增加了，更适用于测定大量突变型的定位工作。 第五章 要点 1）细菌和病毒的三种遗传分析方法：转化、接合、转导 2）掌握F＋ 、 F- 、 F’、 Hfr的特点 3）掌握中断杂交和重组作图的原理 4）噬菌体基因重组的特点、噬菌体重组实验三点测交 5）顺反子的概念，顺反测验的结果判断 * 5.3 噬菌体的遗传和作图 主要内容: 1??噬菌体的突变型及基因重组的特点； 2 重组实验（用两点测交与三点测交测定噬菌 体交换值）; 3 Benzer的重组实验（基因的精细作图）； 4 噬菌体的互补测验； 5 缺失作图； T2噬菌体： ① 噬菌斑形状 正常噬菌体r + ：噬菌斑小而边缘模糊 r - 突变体（速溶性）：噬菌斑大而边缘清楚 ② 寄主范围： h + 噬菌体：只侵染大肠杆菌B株→半透明噬菌斑 h - 突变株：能利用B株和B/2株→透明噬菌斑 2 重组实验-两点测交 E.coli 1 和 2 T2噬菌体的杂交 h+r- × h-r+ E. coli 1 基因型 表现型 h-r+ 亲组合 透明,小 h+r- 亲组合 半透明,大 h-r- 重组合 透明,大 h+r+ 重组合 半透明,小 T2的环形遗传图 T2噬菌体的r突变，根据噬菌斑形态分成r1、r7、r13 ① ② ③ ④ 不同的r突变株，其重组型出现的频率不同，说明r1、r7、r13距h基因的距离不同，即它们位于T2噬菌体的不同位置上，有4种可能的连锁图。 通过r13r