基因克隆载体-噬菌体…要点.ppt

基因克隆载体 生物与食品工程学院 噬菌体克隆载体 能感染细菌的病毒统称为噬菌体 噬菌体有双链噬菌体，也有单链噬菌体。 双链噬菌体：λ类噬菌体 单链噬菌体：M13噬菌体 λ类噬菌体 DNA + 蛋白质外壳 λ噬菌体感染时，通过尾管将DNA注入大肠杆菌，而将其蛋白质外壳留在受体细胞外 λ噬菌体在噬菌体中是线性DNA分子，进入宿主细胞后，连接成环状，连接末端称为cos位点 λ类噬菌体 λ类噬菌体DNA全长48520bp λ类噬菌体有50多个基因，功能相近的聚集成簇 λ类噬菌体DNA有些区域对λ类噬菌体的生长并非必须，可以缺失或被外源DNA取代 λ噬菌体 溶菌生长模式 溶源生长模式 λ类噬菌体 溶菌方式： 在条件适合细菌繁殖时，利用宿主菌中的酶类和原料，λDNA上基因表达合成构成噬菌体头、尾和尾丝所需的各种蛋白质，λDNA经多次复制合成许多子代λDNA，于是装配成许多子代的λ噬菌体，最后裂菌，释放出新的λ噬菌体。 λ类噬菌体 溶源方式： 进入细菌的λDNA可整合入细菌的染色质DNA中，细菌染色体DNA复制，传给细菌后代，这个稳定潜伏在细菌染色质DNA中的λDNA称为原噬菌体，含有原噬菌体的细菌称为溶源菌。 λDNA的整合是可逆的，原噬菌体可从宿主DNA中切出，进入溶菌性方式的繁殖。 λ噬菌体载体的构建策略 一、切去非必需区，抹去多余的限制性