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- 2017-06-12 发布于湖北
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2.干燥法 可采用多种方法使细胞干燥,如空气干燥法、真空干燥法、喷雾干燥法和冷冻干燥法等。干燥法使细胞壁膜间的结合水丧失,细胞渗透压改变。当用丙酮、丁醇或缓冲液等对干燥细胞进行处理时,细胞内物质就很容易被抽提出来。空气干燥法适用于酵母,真空干燥法适用于细菌,冷冻法适用于不稳定的酶。 * 3.压力差破碎法 通过压力的突然变化,使细胞破碎的方法称为压力差破碎法。常用的方法有高压冲击、突然降压及渗透压变化等方法。 (1)高压冲击法是在结实的容器中装入细胞和冰晶、石英砂等混合物,然后用活塞或冲击锤施以高压冲击,压力可达50~500 MPa,从而使细胞破碎。 (2)突然降压法又称为爆炸式降压法。该方法是将细胞悬浮液装入高压容器,通入氮气或二氧化碳,加压5~50 MPa,振荡几分钟,使气体扩散到细胞内,然后骤然排出气体,使压力骤降至常压,导致细胞迅速膨胀而破碎。 * (3)渗透压破碎法是一种较温和的细胞破碎法。 将细胞放在高渗透压的介质中(如一定浓度的甘油或蔗糖溶液),达到平衡后,介质被突然稀释,或者转入渗透压低的缓冲液或纯水中,由于渗透压的突然变化,水迅速进入细胞内,引起细胞溶胀而破裂。 * 4.改进高压法 改进高压法(X-press法)是将浓缩的菌体悬浮液冷却至-30~-25℃形成冰晶,利用500 Mpa以上的高压冲击,将冷冻细胞从高压阀小孔中挤出。细胞由于冰晶的磨损
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