仪器分析_课件_第三章：紫外—可见分光光度法.pptVIP

（四）检测器 检测器的功能是检测信号、测量单色光透过溶液后光强度变化的一种装置。 常用的检测器有光电池、光电管和光电倍增管等。 硒光电池对光的敏感范围为300~800nm，其中又以500 ~ 600nm最为灵敏。这种光电池的特点是能产生可直接推动微安表或检流计的光电流，但由于容易出现疲劳效应而只能用于低档的分光光度计中。 光电管在紫外-可见分光光度计上应用较为广泛。 * 光电倍增管是检测微弱光最常用的光电元件，它的灵敏度比一般的光电管要高200倍，因此可使用较窄的单色器狭缝，从而对光谱的精细结构有较好的分辨能力。 （五）信号指示系统 它的作用是放大信号并以适当方式指示或记录下来。常用的信号指示装置有直读检流计、电位调节指零装置以及数字显示或自动记录装置等。 很多型号的分光光度计装配有微处理机，一方面可对分光光度计进行操作控制，另一方面可进行数据处理。 * 二、紫外-可见分光光度计的类型 紫外-可见分光光度计的类型很多，但可归纳为三种类型，即单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计。 1 单光束分光光度计 经单色器分光后的一束平行光，轮流通过参比溶液和样品溶液，以进行吸光度的测定。这种简易型分光光度计结构简单，操作方便，维修容易，适用于常规分析。 2 双光束分光光度计 经单色器分光后经反射镜分解为强度相等的两束光， * 一束通过参比池，一束通过样品池。光度计能自动比较两束光的强度，此比值即为试样的透射比，经对数变换将它转换成吸光度并作为波长的函数记录下来。 双光束分光光度计一般都能自动记录吸收光谱曲线。由于两束光同时分别通过参比池和样品池，还能自动消除光源强度变化所引起的误差。 3 双波长分光光度计 由同一光源发出的光被分成两束，分别经过两个单色器，得到两束不同波长（?1和?2）的单色光； * 利用切光器使两束光以一定的频率交替照射同一吸收池，然后经过光电倍增管和电子控制系统，最后由显示器显示出两个波长处的吸光度差值ΔA（ΔA=A?1-A?2）。 对于多组分混合物、混浊试样（如生物组织液）分析，以及存在背景干扰或共存组分吸收干扰的情况下，利用双波长分光光度法，往往能提高方法的灵敏度和选择性。利用双波长分光光度计，能获得导数光谱。 通过光学系统转换，使双波长分光光度计能很方便地转化为单波长工作方式。如果能在?1和?2处分别记录吸光度随时间变化的曲线，还能进行化学反应动力学研究。 * 它可用来进行在紫外区范围有吸收峰的物质的检定及结构分析，其中主要是有机化合物的分析和检定，同分异构体的鉴别，物质结构的测定等； 另一方面，如果物质组成的变化不影响生色团及助色团，就不会显著地影响其吸收光谱，因此物质的紫外吸收光谱基本上是其分子中生色团及助色团的特性，而不是它的整个分子的特性。 * 所以，单根据紫外光谱不能完全决定物质的分子结构，还必须与红外吸收光谱、核磁共振波谱、质谱以及其它化学的和物理化学的方法共同配合起来，才能得出可靠的结论。 * 当然，紫外光谱也有其特有的优点。 例如具有π键电子及共轭双键的化合物，在紫外区有强烈的K吸收带，其摩尔吸收系数 可达104～105L·mo1-1·cm-1，检测灵敏度很高(红外吸收光谱的ε很少超过103L·mo1-1·cm-1)，因而紫外吸收光谱的 λmax和 εmax还是能像其它物理常数，如熔点、旋光度等一样，可提供一些有价值的定性数据。 其次，紫外吸收光谱分析所用的仪器比较简单而普遍，操作方便，准确度也较高，因此它的应用是很广泛的。 * 1．定性分析 以紫外吸收光鉴定有机化合物时，通常是在相同的测定条件下，比较未知物与已知标准物的紫外光谱图，将两者的谱图相同，则可认为待测试样与已知化合物具有相同的生色团。如果没有标准物，也可借助了标准谱图或有关电子光谱数据表进行比较。 * 但应注意，紫外吸收光谱相同，两种化合物有时不一定相同，因为紫外吸收光谱常只有2～3个较宽的吸收峰，具有相同生色团的不同分子结构，有时在较大分子中不影响生色团的紫外吸收峰，导致不同分子结构产生相同的紫外吸收光谱，但它们的吸光系数是有差别的，所以在比较λmax的同时，还要比较它们的εmax * 2. 有机化合物分子结构的推断 根据化合物的紫外及可见区吸收光谱可以推测化合物所含的官能团。 a. 例如化合物在220～800nm范围内无吸收峰，它可能是脂肪族碳氢化合物、胺、腈、醇、羧酸、氯代烃和氟代烃，不含双键或环状共扼体系，没有醛、酮或溴、碘等基团。 b.如果在210～250nm有强吸收带，可能含有二个双键的共轭