利用重组大肠杆菌生产人生长激素发酵工艺研析.pdfVIP

生物技术通报 · · 20 10 6 研究报告 BIOTECHNOLOGY B ULLETIN 年第 期 利用重组大肠杆菌生产人生长激素发酵工艺的研究 朱振洪 葛立军 刘文洪 ( ， 310053) 浙江中医药大学生物工程学院 杭州 : ， E coli / BL21 (DE3)/ pET30a (+ )-hGH 。 摘 要 在摇瓶培养和发酵罐培养条件下 研究了 工程菌的不同发酵工艺条件 :M9-2 ，37 ℃ 、pH 6 8 － 7 4 、 OD 3 0 － 4 0 ，IPTG 确立了该工程菌的最优化工艺参数 培养基 值为 诱导起始菌体密度为 600 达 浓度 1 mmol / L ， 50% ， 10% 、5% Yeast extract 5% Tryptone 。 ， 为 诱导时溶氧控制为 以上 补料为 甘油 和 该工艺条件经过连续三批发酵 ， ， 20% 。 证实稳定可行 目的蛋白在胞间质呈可溶性表达表达量占菌体总蛋白的 以上 : 关键词 大肠杆菌 人生长激素 发酵 Fermentation Conditions for Recombinant Human Growth Hormone Production in E coli Zhu Zhenhong Ge Lijun Liu Wenhong (Bio-engineering College ，Zhej iang Chinese Medicine University ，Hangzhou 310053) Abstract : The optimum culture conditions of the bacterial strain of recombinant growth hormone (E. coli / BL21 (DE3)/ pET32a (+ )-hGH)were determined. The optimum expression conditions were found to be at 37 ℃ temperature ，pH range 6 8 － 7 4 ，in- duced beginning OD600 3 0 － 4 0 ，IPTG concentration kept 1 mmol / L ，the dissolved oxygen concentration maintained at over 50% ，and feeding medium 10% glycerol + 5% Yeast extract + 5% Tryptone. The conditions were confirmed by continuous three fed-batch fermen- tation ，Soluble rhGH can be expressed stably and estimated at 20% of the total bacterial protein. Key words : E.