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生物技术通报
·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第 期
2014 1
农杆菌介导韭菜遗传转化相关因素的研究
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常婧 高行英 李小东 侯雷平 李梅兰
(1. 山西农业大学园艺学院,太谷 030801 ;2. 方兴现代农业有限公司,长治 046600)
摘 要 : 以 “汉中冬韭”韭菜品种为试验材料,用含有pCAMBIA330 1 质粒的根癌农杆菌菌株EHA 105 对影响韭菜遗传转化
效率的多种因素进行研究。结果表明,诱导40 d 的愈伤组织,GUS 基因瞬时表达率达到93% ,且最适宜于不定芽的分化 ;当乙酰
丁香酮 (AS )的浓度为100 μmol/L 时,愈伤的GUS 表达率达到9 1% ,植株再生率为7.9% ,AS 浓度增加时其值也不会增加 ;菌液
OD600 值为0.6 侵染10 min 时,与其他组合相比,外植体受伤程度小,GUS 表达率及再生率最高;侵染后的愈伤共培养3 d 后,农
杆菌生长较少,GUS 表达率为91.1% ,而再生率达到7.2% ,为最佳的共培养时间。通过试验得到韭菜遗传转化因素的最佳条件,
为今后的遗传转化提供一些参考。
关键词 : 韭菜 农杆菌 GUS 染色 遗传转化
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Research on the Factors Related to Agrobacterium mediated Genetic
Transformation of the Chinese Chive
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Chang Jing Gao Xingying Li Xiaodong Hou Leiping Li Meilan
(1. College of Horticulture ,Shanxi Agriculture University ,Taigu 03080 1 ;2. Fangxing Modern Agriculture Co. Ltd, Changzhi 046600 )
Abstract: Using “Hanzhong Dongjiu” variety and the Agrobacterium EHA 105 containing pCAMBIA330 1 plasmid as the material, it
studied the factors which could influence transformation efficiency of Chinese chive. The results showed that transient expression rate of GUS
gene reached 93% with the callus cultured for 40 d as the explant and the adventitious buds differentiated well. When 100 μmol/L acetosyringone
was added to the miedium, GUS expression rate of the callus reached 9 1% an
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