重金属汞单克隆抗体制备与免疫检测方法建立.pdf

摘要 重金属汞单克隆抗体制备与免疫检测方法建立 捅璺 重金属是有毒和对环境有持久污染的物质，它并不像碳源污染物那样能完 全降解为无毒的物质，而仅仅是通过一些有限的生物的或化学过程进行转化． 这些转化对一些特定的金属只是限制其毒性或可溶性，一些金属通常竞争过程 重新循环，最终又恢复到原来的毒性状态．在环境中金属离子长时问结合在土 壤中或沉淀物中，这些结合的金属除了对下层生长的动物的外都相对无毒。但 天气的变化．土壤或水中PH值或环境的结合都能够使金属发生移动，从而大 大提高了它们的可利用性和高效的毒性．汞是牵陛最强的重金属元素之一，目 前汞的检测方法仍然依赖传统仪器，但免疫检测方法具有检测快速、费用低． 易于操作、易懂、简单易携、而且高灵敏性和可选择性等特点，近年来日益受 到国内外广泛的关注。 本研究以匙孔血蓝蛋白(KLIO与汞离子通过双功能螯合剂异硫氰基．苯甲基 疫BALB／C小鼠，应用杂交瘤技术，经ELISA法筛选及有限稀释法亚克隆化， 获得了5株可稳定分泌抗重金属汞的杂交瘤细胞株(聃9、E／B2、1／Fll，l／H7和 细胞培养土清液效价分别达1：640、l：320、1：160，腹水效价分别达l：6400、 与其它金属离子均无明显交叉反应，具有较高的特异性．本研究成功制备的高 亲合力和高特异性的抗汞单克隆抗体，为建立农产品和环境中重金属汞的快速 免疫检测技术奠定了基础。 选取一株杂交瘤细胞细胞B／B1l所分泌的抗体进行研究。通过对盐离子强 度等四个影响因子的研究建立了ELISA检测体系，其检测条件为：包被抗原 纵坐标与H92+浓度(mM)的负对数值作横坐标建立检测曲线，在 为1．2％和4．7％，超纯水、自来水、池塘水样和小青菜样品中的添加回收率分 别为102．21％、96．92％．103．23％和87．12％。 关键词：汞；单克隆抗体；ELISA；检测方程 重金属汞单克隆抗体的制备与免疫检测技术的研究 of Monoclonal PreparationSpecific AntibodiesandEstablishmentof of ImmunoassayMercury ABSTRACT environmental metalsa托loxicand contaminanls．Unlike Heavy persistent thatcanbe to carbon-basedcontaminants degraded barlnless completely relatively uansformedin alimitednumberof ions锄be products．metal only waysby or r豇ncdiafion suchtransformationsare chemical biological processes．While intendedtolimitthe or ofa metal are toxicitysolubilitygiven species，thereusually will innaturethat atleastsomeoftheme