脱落酸(ABA)对植物开花的影响：NCED基因表达、ABA水平和植物开花三者之间的关系.pdfVIP

中文摘要 摘要 植物开花是有花植物生活中一个极其重要而复杂的事件。很多植物生理学研 究表明ABA与植物开花有关，会影响植物的开花时间。而且已有研究证明NCED 催化的9．顺．环氧类胡萝b素的裂解反应是ABA生物合成中的关键步骤。因此通 过调控脚基因的表达改变植物体内ABA含量，研究ABA水平与植物开花 时间之间的关系是可行的，并且具有一定的理论意义和应用价值。本文对朋￡ED 基因表达、ABA水平、植物开花这三者之间的关系进行了研究，主要结果如下： 1．o心脚基因的克隆 1．1 电点为6．09。用ChloroPServer在线预测，o柏妃四的氨基酸序列鼽删殴∞，、 n蝴磁D2和凡蝴蚴相似，N末端无叶绿体转运肽。对比分析显示C，劬，cED与 豌豆R朋C团，和拟南聊删CEDJ『的氨基酸序列有很高的同源性，分别为84％和 已知朋ZED基因所共有的四个氨基酸保守区以及四个保守的组氨酸。 2．植物表达载体的构建及烟草的遗传转化 用限制性内切眺I．：LrbaI和BamH1分别酶切含有。棚，cED和乜朋磁DJ， 酶进行连接后，转化大肠杆菌，即获得了含有目的基因的植物表达载体。通过酶 切分析和DNA测序分析确定目的基因的插入方向。共构建了3个正义和3个反义 叶盘法转化烟草，便得到相应的转基因植株。 3．转基因植株的检测 抽提转化株的DNA，经特异引物的PCR分析，结果表明脚基因已经整合 了表达。用ELISA法对所有转化株的ABA含量进行了测定，结果显示正义转化株 脱落酸(ABA)对植物开花的影响 的ABA含量没有显著高于对照株，最高的只高于对照25．4％；反义转化株的ABA 水平均低于对照株。 4．转基因植株的抗旱试验和表型观察 对。砌彻基因的转化株的抗旱试验表明在相同的土壤水分条件下，正义转 化株相对于反义转化株和对照株具有更强的耐旱能力，反义转化株相对于野生型 植株其对干旱更敏感。 株高明显矮于野生型植株，而且叶片数、最大叶的叶长和叶宽均小于野生型和其 他转化株。综合其他研究结果，提出了关于ABA与植物正常生长的高低两个阈值 的观点。 对。柏彻基因转化株的开花情况的统计结果表明不论是正义的还是反义 的转化株露出花苞所需的时间均稍短于对照株，正义转化株的表现更为明显，并 对此现象进行了讨论。 关键词：^『i疆D，ABA，开花 英文摘要 affects relationsh Abscisicacid ipamong plantflowering：the NCED contentand expression，ABAflowering XU PingoZhen DirectedAssociatedProfessorHU by Yun-Qian Abstract Floral isan and eventinthelife of complicated cycle developmentimportant ABA in researchesthat isinvolved floweringplants．Manyplantphysiologicalsuggest