矿物岩石学报硅酸盐细菌代谢产物对硅酸盐矿物的风化作用.docVIP

硅酸盐细菌代谢产物影响硅酸盐矿物风化作用的模拟试验 肖国光1,2） 孙德四1,2） 曹飞1，2） ( 1.九江学院化学与环境工程学院，九江 332005；2.北京科技大学土木与环境工程学院，北京 100008) 摘要：实验选用一株硅酸盐细菌，研究了实验条件下该菌株所产生的代谢产物对斜长石的分解与脱硅、铝的作用。 通过检测不同风化培养基中代谢产物的种类与浓度、代谢产物与矿物相互作用过程中释放矿物中硅、铝的含量以及矿物晶体结构的变化，研究该菌株代谢产物对斜长石的风化过程和作用机制。结果表明：该菌株在不同的培养基中均会分泌氨基酸、有机酸与多糖等代谢产物，其中，在矿物风化培养基中菌株的代谢能力明显要高于无矿物培养基；各种代谢产物均对斜长石有一定的风化作用，多糖对矿物的分解作用最为明显，各代谢产物的混合物对斜长石的分解能力要高于各自代谢产物对矿物的分解能力。分析认为三种代谢产物的混合物在风化矿物的过程中具有一定的协同作用。 关键词: 硅酸盐细菌；代谢产物；硅酸盐矿物；斜长石；风化作用 中图分类号：Q939.1， TD952.5 文献标示码：A 微生物对铝硅酸盐矿物的风化机理研究表明，微生物主要是通过有机酸、生物膜、胞外聚合物和氧化还原作用的方式风化铝硅酸盐矿物[1]。它们同时存在于微生物参与的矿物风化作用过程中，互相影响，协同作用[2]。根据现有文献报道，硅酸盐细菌[3]（B. circulans， B. mucilaginosus 与B.edaphicun）或其它菌种如Piloderma sp. [4]、Aspergillus fumigatus [5]、Aspergillus niger [6]、Penicillium sp. [7]、Mucor sp. [8]、Trichoderma sp. [9]、Botrytis sp. [10]等菌北京北纳创联生物技术研究院L-1（根据2#培养基中发酵液中单酸浓度配制）；C）加入多糖，浓度为7.5 g·L-1（多糖从发酵液中提取）；D）加入混有机酸酸+多糖，浓度为8.62 g·L-1；E) 加入混合有机酸＋多糖＋混合氨基酸，浓度约为8.621 g·L-1；F）接入活细菌，初始浓度为4.7×107个·mL-1。以上每组试验均设三个平行样。将250 mL锥型瓶置于培养摇床中，在28℃，200 r·min-1的条件下连续浸出15d。浸出结束后，测定浸出液中SiO2的含量，采用SEM 与XRD分析15天后各矿物的表面形貌及结构变化。 1.3 主要测定方法 氨基酸的测定[3]：取不同时期的发酵液10毫升，加新鲜配制的5%的三氯醋酸60毫升充分混合，离心（2500g，15min），将上清液倒入500ml圆底烧瓶中，在400C小减压蒸干，再加蒸馏水10ml，重复此操作三次，以除去三氯醋酸，用0.04M盐酸稀释至适当的浓度，用HPLC做定性与定量分析。 有机酸的测定[3]：取不同时期的发酵液20毫升加12M/L的硫酸10毫升，搅拌后静置1小时，然后加入1mol/L硫酸100毫升，低温搅拌30分钟，离心，上清夜50℃真空浓缩至10毫升，浓缩液用阳离子交换树脂柱以除去氨基酸。用0.03% H3PO4洗脱样品，洗脱液真空浓缩至5毫升，用HPLC法测定四种有机酸（草酸、柠檬酸、酒石酸、苹果酸）的含量。 多糖的测定[3]：对不同时期的发酵液静置沉淀至固液分离，过滤除出发酵液中的矿粉，然后对上清液用95%乙醇沉淀荚膜多糖，离心（3900g，15min），收集多糖，50℃烘干，称重，得粗荚膜多糖。 浸出液中硅与铝的测定[17]：硅钼蓝分光光度法与铬青天S分光光度法。 斜长石被细菌代谢产物作用前后的表面形貌及结构变化分析: 采用XRD(Japan Rigaku D/MAX-RB)分析矿物被细菌及代谢产物作用前后的结构变化；用SEM（仪器型号：TESCAN- VEGAIIRSU）观察细菌及代谢产物浸出前后矿物表面微观形态变化。 2 结果与讨论 2.1 菌种发酵液中代谢产物测定结果 在不同的培养基中，由于矿物不同，发酵液中代谢产物的含量与类别均有一定的差别。在四种发酵培养基中有机酸的含量测定结果见图1 （A—D）；不同发酵培养液中多糖含量与pH值测定结果见图2 A与图2 B；发酵培养液中氨基酸种类与含量的测定结果见表1。 图1 不同发酵培养液中各种有机酸含量随时间的变化 Fig.1 Change of contents of organic acids in different media with time 图2 发酵培养液中多糖含量与pH值随培养时间的变化 Fig.2 Change of contents of polysaccharide and pH values in d