BAC滤池应急处理小分子醛类污染物过程中生物菌落特性变化教程详解.docVIP

BAC滤池应对小分子醛类污染物过程中生物菌落特性变化分析 Transformations of the Bacterial Biodiversity in BAC Filter Treating Water Contaminated by Acetaldehyde and Acraldehyde 张春雷，许光，冯博然，郑鹏 （北京市自来水集团有限责任公司，100031） 摘要：本文在实验室条件下提取BAC滤池处理乙醛、丙烯醛等小分子醛类污染物前（SC）后（SY）活性炭表面微生物总DNA，构建16S rDNA克隆文库，并通过16S rDNA序列的系统发育分析，对样品中细菌种群多样性及群落结构的前后变化进行了分析。结果表明BAC滤池处理乙醛和丙烯醛前后细菌种群和菌落结构发生了显著变化。SC样品文库中阳性克隆的16S rDNA序列分属13个细菌类群Planctomycetes（12%）、Betaproteobacteria（11%）、Nitrospira（6%）是其中可辨识的最大几个类群，HPC量为1.18×107 CFU/g；而SY样品阳性克隆的16S rDNA序列分属细菌类群Unidentified bacteria（1%），HPC量增加到了1.28×108 CFU/g。SY样品文库中与已培养种或克隆相似度较高的种群数为33种，远低于SC样品的81种，且主要菌群丰度增高显著。SY文库中属于Betaproteobacteria类群SY-1、SY-5、SY-14、SY-107微生物量的测定采取HPC法《生活饮用水标准检测方法》HPC检测结果 结果如表1，图1-1、1-2所示。 表1 活性炭HPC计数结果CFU·g-1 干碳菌量/ CFU·g-1 SC 60.75 4.64×106 1.18×107 SY 56.75 5.56×107 1.28×108 图1-1 SC样品超声洗脱水样稀释1000倍菌落形态 图1-2 SY样品超声洗脱水样稀释10000倍菌落形态 2.2微生物多样性及系统发育学分析将每种基因型的序列输入RDP网站，利用Classifier?程序确定其系统发育类群。结果文库中细菌克隆的16S rDNA序列分属细菌类群（如图unclassified_Proteobacteria（3%）、Acidobacteria（15%）、Verrucomicrobia（4%）、Planctomycetes（12%）、unclassified bacteria（11%）、Nitrospira（6%）、Gemmatimonadetes（2%）、Bacteroidetes（3%）、Actinobacteria（2%）。 而SY样品结果则显示文库中细菌克隆的16S rDNA序列分属细菌类群（如图Unidentified bacteria（1%）。 相对于SC样品，SY样品中细菌类群减少7个。其中在SC样品中占相当比重（55%）的Acidobacteria（15%）、Verrucomicrobia（4%）、Planctomycetes（12%）、unclassified bacteria（11%）、Nitrospira（6%）、Gemmatimonadetes（2%）、Bacteroidetes（3%）、Actinobacteria（2%）均未检出。Alphaproteobacteria的比重也由25%下降至10%。与之形成鲜明对比的是Betaproteobacteria的比重从SC样品的11%激增到78%，增加6倍有余；此外Deltaproteobacteria也从2%增加到5%，增加1.5倍。 细菌类群的改变和集中凸现了外界因素（乙醛和丙烯醛）对自然状态下炭滤池菌群的干扰和影响。 为了进一步了解两个样品表面菌群的系统发育地位，本研究还将每种基因型的序列输入NCBI网站，用BLAST程序与数据库中已有的序列进行比对分析，下载相似性最高的序列和相似性较高的已知种的序列作为参考。将所有序列用BioEdit中ClustalW程序比对后，用MEGA 4.0软件绘制系统发育树。基于16S rDNA序列的Proteobacteria细菌系统发育树基于16S rDNA序列细菌系统发育树基于16S rDNA序列的Proteobacteria细菌系统发育树基于16S rDNA序列细菌系统发育树HPC结果分析 SY样品中微生物的量增加明显，从1.18×107 CFU/g增加到1.28×108 CFU/g，单位质量活性炭表面HPC的量比原炭SC高了一个数量级。而且从菌落形态上看，也有较大差异。SY炭中的细菌生长速度很快，3天时间菌落即清晰可见，而SC样品中的细菌长到第七天大多数菌落仍然较小（如图1-1，1-2）。 原因可能是J水厂炭滤池进水中的有机